一株猫疱疹病毒Ⅰ型的分离鉴定及其单克隆抗体的制备与应用

作     者：王旭贞 周登元 曹龙龙 彭佳佳 李国红 史开拓 张燕 

作者机构：山西省畜牧兽医学校 武汉科前生物股份有限公司 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2023年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：武汉市科技计划项目(2019020702011378) 武汉东湖高新区“3551光谷人才计划” 湖北省技术创新专项重大项目(2017ABA056) 

主　　题：猫疱疹病毒 分离 单克隆抗体 制备 鉴定 

摘      要：为获得猫疱疹病毒Ⅰ型（FHV-1）特异性的单克隆抗体，以用于FHV-1的诊断与防控，本研究采集疑似FHV-1感染的患病猫眼鼻咽混合拭子进行PCR鉴定，利用猫肾细胞（F81）对阳性拭子进行病毒分离纯化，并以灭活的FHV-1病毒为抗原免疫BABL/c小鼠，进行单克隆抗体的制备。结果显示，通过接种F81细胞，成功分离纯化一株FHV-1毒株，命名为FHV-WH株，该毒株能够稳定传代且病毒滴度较高。经制备FHV-WH株抗原免疫小鼠，筛选获得3株能够稳定分泌抗FHV-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为3F3、2D8和4C8。IFA检测和Western blot检测结果显示3F3株杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能与FHV-1发生特异性结合，其亚型鉴定为IgG1型，轻链属于Kappa型。综上所述，本研究通过FHV-1流行毒株FHV-WH株的分离纯化以及抗FHV-1单克隆抗体的制备，为FHV-1生物学特性研究以及快速准确诊断方法的建立奠定基础。