不同长骨制备的脱矿骨基质中BMP-2含量测定及其成骨性能的体外研究

作     者：赵永杰 尹刚 杜瑞 王丽敏 邓明明 关国锋 孙广超 刘颖 ZHAO Yongjie;YIN Gang;DU Rui;WANG Limin;DENG Mingming;GUAN Guofeng;SUN Guangchao;LIU Ying

作者机构：滨州医学院附属医院足踝外科山东滨州256603 北京威达峰医学生物材料有限责任公司北京102200 

出 版 物：《中国修复重建外科杂志》 (Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery)

年 卷 期：2023年第37卷第8期

页      面：945-951页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主　　题：脱矿骨基质 BMP-2 细胞增殖 成骨分化 

摘      要：目的测量不同长骨制备的脱矿骨基质(demineralized bone matrix,DBM)中BMP-2的浓度,评价不同DBM诱导MC3T3-E1细胞成骨分化的能力。方法取同一尸体标本不同长骨制备DBM,按取材部位分成尺骨组(uDBM组)、肱骨组(hDBM组)、胫骨组(tDBM组)和股骨组(fDBM组),以煮沸后的DBM为对照组(cDBM组)。将各组DBM经盐酸胍提取蛋白后采用ELISA法检测BMP-2含量;然后将其与MC3T3-E1细胞共培养,细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法观察各组细胞增殖情况,行茜素红、ALP、Van Gieson染色定性观察和ALP含量定量分析各组细胞成骨分化能力;并采用线性回归分析DBM中BMP-2浓度对细胞合成ALP的影响。结果各DBM组间BMP-2浓度比较差异均有统计学意义(PtDBM组hDBM组uDBM组cDBM组。共培养14 d,各组细胞表达ALP、钙化结节和胶原纤维的程度与DBM中BMP-2浓度分布趋势一致。ALP含量从低到高依次为cDBM组uDBM组hDBM组tDBM组fDBM组,组间差异均有统计学意义(P0.05)。线性回归分析示,y^=0.361+0.017x,DBM中BMP-2浓度对细胞ALP含量的影响有统计学意义(t=3.552,P=0.005);BMP-2浓度每增加1 ng/g,ALP含量将增加0.017[95%CI(0.006,0.027)]U/100 mL。结论不同长骨中天然BMP-2浓度差异较大,下肢长骨高于上肢长骨,骨骼取材部位是影响DBM骨诱导能力的重要因素。