中间苍白杆菌尼古丁降解相关基因ocnH的克隆及功能分析

作     者：王萌蕾 许倍滔 夏珍珍 王力 张建国 李晓华 WANG Menglei;XU Beitao;XIA Zhenzhen;WANG Li;ZHANG Jianguo;LI Xiaohua

作者机构：中南民族大学生命科学学院&微生物资源与利用湖北省工程技术研究中心武汉430074 江苏神力生态农业科技有限公司宜兴214221 

出 版 物：《中南民族大学学报（自然科学版）》 (Journal of South-Central University for Nationalities：Natural Science Edition)

年 卷 期：2023年第42卷第4期

页      面：457-461页

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学资金资助项目(31070087) 中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(CZY19018) 企业委托资助项目(HZY20042,HZY21015) 

主　　题：中间苍白杆菌SCUEC4菌株 尼古丁降解 ocnH基因 克隆与表达 功能分析 

摘      要：通过PCR扩增获得中间苍白杆菌SCUEC4菌株中与尼古丁降解相关的ocnH基因,构建重组质粒pET28a(+)-ocnH,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,并对表达条件进行优化,用高效液相色谱法测定重组表达菌株的马来酸异构酶活性.结果表明:ocnH基因大小为585 bp,编码蛋白分子量约为20.6 kDa.重组表达菌株在IPTG浓度为0.6 mmol·L^(-1)、诱导温度为25℃、诱导表达时间为20 h时,OcnH蛋白的表达量较高.转入pET28a(+)-ocnH的大肠杆菌BL21(DE3)菌株具有将马来酸转化为富马酸的功能.