髓源性生长因子抑制RAW264.7细胞炎症反应及破骨分化
Myeloid-derived growth factor inhibits the inflammatory response and osteoclast differentiation of RAW264.7 cells作者机构:中部战区总医院内分泌科武汉430070
出 版 物:《中华内分泌代谢杂志》 (Chinese Journal of Endocrinology and Metabolism)
年 卷 期:2023年第39卷第6期
页 面:499-505页
核心收录:
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学]
主 题:髓源性生长因子 炎症反应 破骨细胞 RAW264.7细胞
摘 要:目的探讨髓源性生长因子(myeloid-derived growth factor,MYDGF)对RAW264.7细胞炎症反应及破骨分化的影响。方法培养破骨细胞前体细胞RAW264.7,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度MYDGF重组蛋白(rMYDGF)对RAW264.7细胞活性的影响;利用脂多糖(LPS)对RAW264.7细胞进行炎症诱导,然后观察rMYDGF干预后炎症介质表达及细胞极化情况;利用核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)对RAW264.7细胞进行破骨分化诱导并添加rMYDGF干预,随后通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞分化的情况,显微镜下观察破骨吸收陷窝及肌动蛋白环(F-actin环)数目;逆转录PCR检测破骨细胞分化过程中活化T细胞核因子1(Nfatc1)、组织蛋白酶K(CTSK)和c-Fos基因的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western印迹)检测核因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白磷酸化水平。结果MTT实验结果显示,rMYDGF浓度低于100 ng/mL时对RAW264.7细胞活性无明显抑制;rMYDGF抑制LPS诱导的炎症介质表达及M1型细胞极化;破骨诱导后,rMYDGF干预组与对照组相比,TRAP阳性细胞数目和面积均减少,骨吸收陷窝数目和面积均减少,并且F-actin环面积减少,形态不完整;此外,rMYDGF减少破骨细胞分化过程中特异性基因的表达,抑制NF-κB信号通路IκBα蛋白磷酸化。结论MYDGF抑制RAW264.7细胞炎症反应及破骨分化。