PU-H71对增加宫颈癌细胞辐射敏感性的研究

作     者：王建凯 缪国英 王文娟 胡永果 蔡宏懿 Wang Jiankai;Miao Guoying;Wang Wenjuan;Hu Yongguo;Cai Hongyi

作者机构：甘肃省人民医院放疗科兰州730000 甘肃省第三人民医院体检中心兰州730000 

出 版 物：《中华放射肿瘤学杂志》 (Chinese Journal of Radiation Oncology)

年 卷 期：2023年第32卷第6期

页      面：551-556页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：甘肃省自然科学基金(21JR11RA197, 21JR1RA033) 甘肃省人民医院重点项目(ZX-62000001-2021-266) 

主　　题：宫颈肿瘤 PU-H71 热休克蛋白90 DNA修复 辐射敏感性 

摘      要：目的探讨热休克蛋白90(Hsp90)抑制剂PU-H71联合X射线照射对辐射抗性人宫颈癌细胞的作用。方法利用生物信息学分析Hsp90基因在宫颈癌组织和癌旁组织中的表达。通过分次照射法(2 Gy/次, 共30次)获得辐射抗性的宫颈癌细胞系HeLa RR和SiHa RR, 将细胞分为对照组(二甲基亚砜处理)、单纯照射组、PU-H71组(0.5 μmol/L PU-H71处理)、PU-H71+照射组(0.5 μmol/L PU-H71处理24 h后给予照射)。利用克隆形成法检测细胞存活。细胞处理后1、6、24 h, 用免疫荧光法检测γH2AX聚焦点。细胞处理后1、2、6、12、24 h, 利用蛋白质印迹法检测Rad51的表达;细胞处理后2 h, 检测磷酸化的DNA依赖蛋白激酶催化亚基(p-DNA-PKcs)的蛋白质表达。细胞处理后48 h, 流式细胞术检测细胞凋亡。结果 PU-H71增强了辐射抗性宫颈癌细胞对X射线的敏感性。与单纯照射组相比, PU-H71+照射组HeLa RR和SiHa RR细胞, 在10%存活下的辐射增敏比(SER)分别为1.36和1.27, 而凋亡率分别提高了约72.1%和63.1%。PU-H71使辐射诱导的γH2AX聚焦点的持续时间延长, 抑制了DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)的磷酸化, 从而限制非同源末端连接(NHEJ)修复, 同时延迟了同源重组修复。结论 PU-H71通过抑制DNA双链断裂修复途径, 增加了辐射抗性宫颈癌细胞的辐射敏感性, 有望作为一种增强宫颈癌放射治疗疗效的放射增敏剂。