6种新型CpG分子增强新型冠状病毒重组亚单位疫苗的免疫效果比较

作     者：李思奇 高孟 安彤 张柯欣 马培凯 沈钱通 朱赟 庄昉成 陈刚 Li Siqi;Gao Meng;An Tong;Zhang Kexin;Ma Peikai;Shen Qiantong;Zhu Yun;Zhuang Fangcheng;Chen Gang

作者机构：杭州医学院基础医学与法医学院、浙江省医学生物工程疫苗研发重点实验室杭州310053 

出 版 物：《国际流行病学传染病学杂志》 (International Journal of Epidemiology and Infectious Disease)

年 卷 期：2023年第50卷第2期

页      面：98-103页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：浙江省基础公益研究计划(LGD22C080002) 浙江省重点研发计划应急攻关项目(2021C03202) 浙江省教育厅一般科研项目(Y202045358) 浙江省医学生物工程疫苗研发重点实验室(2008F3022)。 

主　　题：佐剂 免疫 亚单位疫苗 CpG寡核苷酸 增强免疫 体液免疫 细胞免疫 

摘      要：目的了解新设计的6组CpG分子在动物体内对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组亚单位疫苗免疫效果的提升作用,以初步筛选出有潜力的新型CpG佐剂。方法通过序列检索比对,确定人鼠同源的CpG基序,以不同的组合方式设计出6条不同的CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)序列,并人工合成相应6种CpG,分别与SARS-CoV-2重组亚单位疫苗联用,已上市的佐剂CpG1018作为阳性对照。以间隔2周的方式免疫BALB/c小鼠2次,免疫后每周取眼眶血检测IgG1和IgG2a指标。2针免疫后21 d处死小鼠,取眼球血检测结合抗体抑制率;取脾脏淋巴细胞进行酶联免疫斑点试验检测。结果初次免疫后14 d,CpG6组小鼠血清IgG2a和IgG1水平分别为3.63±0.27和3.44±1.03,显著高于CpG1018组的2.06±1.30和2.06±0.39。加强免疫后14 d,CpG6组小鼠血清IgG2a水平为6.52±0.21,高于CpG1018组的6.33±0.40。在针对原型株的结合抗体抑制率指标上,初次免疫14 d、加强免疫21 d后,各组间差异存在统计学意义(F=13.66、12.58、19.38和19.38,P均0.001)。初次免疫14 d后,稀释10倍血清中CpG6组小鼠血清抑制率为(64.67±20.41)%,高于CpG1018组[(27.84±20.23)%],差异有统计学意义(t=2.70,P=0.031);加强免疫21 d后,稀释1000倍的血清中CpG6组小鼠血清抑制率针对原型株[(89.71±4.83)%]和Delta株[(79.04±6.32)%]的抑制率水平均显著高于CpG1018组[(70.84±17.20)%和(52.61±14.22)%],差异有统计学意义(t=2.36,P=0.046;t=3.80,P=0.005)。酶联免疫斑点实验结果显示,CpG1018组针对SARS-CoV-2原性株敏感和Delta突变株敏感的特异性IFN-γ分泌细胞数与CpG6组相比,差异均无统计学意义(t=0.76,P=0.469;t=0.78,P=0.459);在特异性IL-2分泌细胞数上,两组差异亦无统计学意义(t=0.70,P=0.503;t=0.90,P=0.395)。结论CpG6与SARS-CoV-2重组亚单位疫苗联用,能在疫苗初次免疫后更快速地在小鼠体内产生体液免疫应答,且加强免疫后体液免疫和细胞免疫效果均不弱于已上市的CpG1018佐剂。CpG6有望成为潜在的备选佐剂与疫苗联用。