沉默Fcgr3降低SiO_(2)诱导的小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S炎性因子表达

作     者：李晓娜 齐先梅 张田甜 王婧 LI Xiaona;QI Xianmei;ZHANG Tiantian;WANG Jing

作者机构：中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理生理学系北京100005 

出 版 物：《基础医学与临床》 (Basic and Clinical Medicine)

年 卷 期：2023年第43卷第6期

页      面：904-908页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82100080) 国家重点研发计划(2021YFC2500700,2021YFC2500704) 中央级公益性科研院所基本科研业务费(2021RC310002,2022RC31006) 

主　　题：免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ 巨噬细胞 炎性因子 

摘      要：目的探讨沉默免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ)对SiO_(2)诱导的小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S炎性因子表达的影响。方法构建Fcgr3 shRNA的慢病毒质粒;人胚肾细胞系293T培养包装产生慢病毒;慢病毒感染沉默MH-S中的FcγRⅢ,并筛选稳定感染的细胞。定量多聚酶链反应(qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MH-S巨噬细胞系中FcγRⅢ的mRNA和蛋白表达。将MH-S细胞分为MH-S+sh-NC、MH-S+SiO_(2)+sh-NC、MH-S+sh-Fcgr3和MH-S+SiO_(2)+sh-Fcgr3,其中SiO_(2)处理条件为100 mg/L连续刺激12 h。通过qPCR检测炎性因子转录水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞培养上清中的炎性因子的含量,包括肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)。结果包装慢病毒并感染细胞后建立稳定沉默Fcgr3的MH-S细胞系,稳定转染细胞中FcγRⅢ的转录与蛋白表达水平较对照组降低(P0.05)。与对照组相比,SiO_(2)刺激后Tnf、Il1b和Il6的转录水平明显升高(P0.05),沉默Fcgr3后炎症因子转录水平显著下降(P0.05);与对照组相比,SiO_(2)刺激后TNF-α和IL-6的分泌量明显升高(P0.05),沉默Fcgr3后炎症因子分泌水平显著下降(P0.05)。结论沉默Fcgr3能够降低SiO_(2)诱导的肺泡巨噬细胞炎性因子的表达。