葛根芩连汤含药血清对缺氧诱导HepG2肝癌细胞糖代谢的影响及机制研究

作     者：许清松 彭程程 李冰涛 张启云 姜丽 李佳 李洋 曾治君 徐国良 XU Qingsong;PENG Chengcheng;LI Bingtao;ZHANG Qiyun;JIANG Li;LI Jia;LI Yang;ZENGZhijun;XU Guoliang

作者机构：江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心江西南昌330004 江西省中医病因生物学重点实验室江西南昌330004 江西省中药药理重点实验室江西南昌330004 江西中医药大学药学院江西南昌330004 江西中医药大学岐黄国医书院江西南昌330004 

出 版 物：《中药新药与临床药理》 (Traditional Chinese Drug Research and Clinical Pharmacology)

年 卷 期：2023年第34卷第5期

页      面：636-645页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(82060826) 江西省卫生和计划生育委员会科技计划项目(202211417) 江西中医药大学校级科技创新团队发展计划项目(CXTD22007) 江西中医药大学校级研究生创新专项资金项目(JZYC22S79) 

主　　题：葛根芩连汤含药血清 HepG2肝癌细胞 缺氧 糖代谢 葡萄糖消耗量 代谢组学 

摘      要：目的探讨葛根芩连汤(GQD)含药血清对缺氧诱导HepG2肝癌细胞糖代谢的影响及机制。方法(1)在缺氧条件(94%N_(2)、5%CO_(2)、1%O_(2))下,通过考察5个缺氧时间点(6、12、18、24、48 h)对HepG2细胞葡萄糖消耗量和细胞活力的影响,确定最佳缺氧时间。(2)设置正常组(常氧条件,15%空白血清)、模型组(15%空白血清)、二甲双胍组(15%空白血清+2 mmol·L^(-1)二甲双胍)、葛根芩连汤含药血清低剂量组(5%GQD含药血清+10%空白血清)、葛根芩连汤含药血清中剂量组(10%GQD含药血清+5%空白血清)、葛根芩连汤含药血清高剂量组(15%GQD含药血清),检测缺氧18 h后各组细胞的葡萄糖消耗量及细胞活力。(3)采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)联用技术进行细胞样品的分离和数据采集;采用正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)筛选差异变量;通过HMDB、KEGG在线数据库中进行代谢物鉴定,以确定葛根芩连汤含药血清干预缺氧诱导HepG2肝癌细胞的潜在生物标志物;最后,通过Metabo Analyst 5.0网站进行潜在生物标志物代谢通路分析。结果(1)与正常组比较,模型组HepG2细胞缺氧12、18 h的葡萄糖消耗量显著降低(P0.05),缺氧48 h的细胞活力显著升高(P0.05)。(3)共鉴定出缺氧诱导HepG2肝癌细胞的潜在生物标志物12个,其中1个生物标志物含量显著上升,11个生物标志物含量显著下降,而GQD含药血清干预可使上述生物标志物明显回调。12个潜在生物标志物涉及甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、α-亚麻酸代谢、花生四烯酸代谢、鞘脂代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、嘧啶代谢、嘌呤代谢以及甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢等9条代谢通路。结论GQD含药血清可能通过调节脂质代谢、氨基酸代谢、嘌呤及嘧啶代谢来改善缺氧引起的HepG2细胞糖代谢异常,提高葡萄糖消耗量。