磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯对人肾小管上皮细胞HKC的毒性效应及凋亡机制研究

作     者：丰一兴 杨奕 李明 施嘉琛 邵兵 FENG Yi-xing;YANG Yi;LI Ming;SHI Jia-chen;SHAO Bing

作者机构：北京市疾病预防控制中心食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013 

出 版 物：《毒理学杂志》 (Journal of Toxicology)

年 卷 期：2023年第37卷第2期

页      面：93-98,107页

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：高层次公共卫生技术人才建设项目资助(学科骨干-02-15) 

主　　题：磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯 人肾细胞 细胞凋亡 线粒体凋亡途径 

摘      要：目的 探讨磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯[tris(1,3-dichloro-2-propyl) phosphate, TDCPP]对人肾小管上皮细胞(human renal tubular epithelial cells, HKC)的凋亡作用,并基于线粒体凋亡途径探讨其效应机制。方法 选取HKC作为受试细胞,经TDCPP(0、25、50、75和100μmol/L)染毒48 h后,利用CCK-8方法检测HKC的细胞存活率,通过高内涵成像系统观察细胞形态,采用基于细胞成像的多参数分析技术,检测TDCPP对线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP)、细胞凋亡及线粒体凋亡途径相关蛋白表达量的影响。结果 随着TDCPP暴露浓度的增加,HKC存活率明显降低(F=54.671;P0.05)。TDCPP浓度高于75μmol/L时,细胞形态发生明显改变,MMP明显降低(F=24.923;P0.05),细胞凋亡率增加(F=29.303;P0.01),线粒体凋亡途径相关蛋白,包括Bcl-2相关X蛋白(B_(ax))、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、细胞色素c和活化的半胱氨酸蛋白酶(cleaved Caspase-3)的表达量以及B_(ax)/Bcl-2的比值均明显增加(F_(B_(ax))=21.152,PB_(ax)0.01;FBcl-2=118.788,PBcl-20.05;F细胞色素c=40.576,P细胞色素c0.01;F_(caspase-3)=70.067,P_(caspase-3)0.01;F_(B_(ax))/Bcl-2=12.192,P_(B_(ax)/Bcl-2)0.01;)。结论 TDCPP可引起HKC线粒体受损,MMP下降,细胞凋亡率增加,线粒体凋亡途径在TDCPP引起的肾细胞凋亡中起到一定的调控作用。