即时痰和体外培养条件下结核分枝杆菌sigma因子表达差异分析

作     者：江丽娜 穆成 孙蕊 王春花 JIANG Lina;MU Cheng;SUI Rui;WANG Chunhua

作者机构：天津市结核病控制中心天津300041 

出 版 物：《公共卫生与预防医学》 (Journal of Public Health and Preventive Medicine)

年 卷 期：2023年第34卷第3期

页      面：52-55页

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：2017年度结核病控制中心科技基金项目(津疾控科) 

主　　题：结核分枝杆菌 sigma因子 痰液 荧光定量PCR(RT-PCR) 

摘      要：目的为了解sigma因子在即时痰的表达情况,探索与致病性结核分枝杆菌毒力关系密切的sigma因子。方法选取2018年1~12月天津市结核病控制中心门诊部确诊的结核病患者,对其痰涂片阳性和xpert阳性确诊的肺结核随机选择20份痰阳性标本进行实验。每一例肺结核患者在其开始治疗前收集2份即时痰标本,一份立刻抽提RNA,一份进行体外培养。体外培养的菌株在生长对数期提取RNA。设计13个sigma因子的特异性引物,通过荧光定量PCR(RT-PCR)的方法,分析其在即时痰临床分离株和体外培养株的转录表达差异。以核糖体16s为参照基因,利用2^(ΔCt)分析sigma因子的转录倍数,将稳定表达的sigA作为统计分析的底物,单因素方差ANOVA分析其余sigma因子的表达差异。结果临床分离菌与H37Rv相比,所有的sigma因子统计分析差异均不显著(P均0.05);临床分离菌与体外培养株相比,只有sigM表达量最高(P0.05),统计分析差异显著。结论sigM在细菌感染的初级阶段转录水平明显增高,但其具体作用还不清楚,可能参与了宿主免疫系统和细菌逃离机制之间的相互平衡。