糖酵解关键酶PFKFB3对婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖、迁移及凋亡的影响
Effects of the key glycolytic enzyme PFKFB3 on the proliferation,migration and apoptosis of hemangioma-derived endothelial cells作者机构:四川大学华西医院小儿外科成都610041
出 版 物:《中华皮肤科杂志》 (Chinese Journal of Dermatology)
年 卷 期:2023年第56卷第4期
页 面:320-324页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金项目(82273556) 四川省科技厅重点研发项目(2022YFS0233、2022YFS0225、2022NSFSC1480) 四川大学从0到1创新研究项目(2022SCUH0033) 四川大学医学+信息中心交叉学科建设开放项目(YGJC004) 四川大学华西医院学科卓越发展1·3·5工程临床研究孵化项目(ZYJC21060、2020HXFH048、2019HXFH056)
主 题:血管瘤 血管瘤内皮细胞 糖酵解 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移 6磷酸果糖2激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3
摘 要:目的研究糖酵解关键酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)对婴幼儿血管瘤(IH)内皮细胞(HemEC)生物活性的影响。方法收集4例增殖期及4例消退期IH组织,从增殖期IH组织中提取原代HemEC,以脐静脉内皮细胞(HUVEC)为对照。通过免疫组化与Western印迹法分别检测PFKFB3在IH组织与HemEC中的表达水平。采用CCK8实验检测0~10μmol/L PFKFB3特异性抑制剂PFK15对HemEC细胞增殖的影响。体外培养HemEC,采用5μmol/L PFK15干预细胞,采用Transwell法观察HemEC迁移能力,流式细胞仪检测HemEC凋亡水平。组间比较采用t检验或方差分析。结果免疫组化显示,增殖期IH组织中PFKFB3表达丰度(74.34%±5.26%)高于消退期(41.46%±2.99%,t=9.40,P0.001)。Western印迹显示,HemEC中PFKFB3相对表达水平(0.73±0.05)高于HUVEC(0.45±0.04,t=8.50,P0.001)。CCK8实验结果显示,0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L PFK15组HemEC增殖活性均低于对照组(均P0.01)。Transwell实验显示,PFK15干预组HemEC迁移数(297±15)低于对照组(422±8,t=12.59,P0.001)。流式细胞仪检测显示,PFK15干预组HemEC凋亡率(6.69%±0.64%)高于对照组(0.34%±0.07%,t=17.07,P0.001)。结论糖酵解关键酶PFKFB3在IH增殖期组织与HemEC中高表达,PFKFB3抑制剂PFK15可抑制HemEC增殖、迁移并促进其凋亡。