LRTN4RL1-AS通过miR-27a-3p靶向PPARγ调节奶牛乳腺细胞乳脂合成

作     者：贾鸿儒 杨超群 王萌 吴章情 昝林森 杨武才 JIA Hongru;YANG Chaoqun;WANG Meng;WU Zhangqing;ZAN Linsen;YANG Wucai

作者机构：西北农林科技大学动物科技学院国家肉牛改良中心杨凌712100 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2023年第54卷第4期

页      面：1465-1477页

核心收录：

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：陕西省自然科学基金(2021JM-100)。 

主　　题：乳脂肪 lncRNA PPARγ miR-27a-3p 

摘      要：旨在探究lncRNA-LRTN4RL1-AS/miR-27a-3p/PPARγ轴在奶牛乳脂合成中的作用及其调控机制。本研究以奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)为试验对象,对处理组与对照组进行3个生物学重复,通过实时荧光定量(real time quantitative PCR,RT-qPCR)、WB(Western blot)、油红O染色和甘油三酯检测、双荧光素酶报告等技术检测lncRNA-LRTN4RL1-AS对BMECs中甘油三酯积累及脂质合成相关基因表达量的影响,验证LRTN4RL1-AS-miR-27a-3p-PPARγ存在内源竞争RNA(competing endogenous RNAs,ceRNA)的靶向关系。结果表明,LRTN4RL1-AS主要在细胞质中表达,干扰LRTN4RL1-AS后显著抑制了BMECs的脂滴形成和甘油三酯积累(P0.05),显著下调脂质合成相关基因CEBPα(P0.01)、CEBPβ(P0.01)和PPARγ(P0.05)表达,且显著上调脂质分解基因HSL表达(P0.05);双荧光素酶报告试验发现,转染mimics-miR-27a-3p,LRTN4RL1-AS突变型组荧光素酶活性显著高于LRTN4RL1-AS野生型组(P0.01),证实LRTN4RL1-AS与miR-27a-3p之间存在靶向结合关系;共转染试验发现,inhibitor-miR-27a-3p逆转了干扰LRTN4RL1-AS对乳脂合成的抑制作用(P0.05),同时降低了si-LRTN4RL1-AS对PPARγ基因的表达抑制。结果显示,LRTN4RL1-AS通过竞争性结合miR-27a-3p调控PPARγ表达来调节BMECs乳脂合成。