m^(6)A修饰的circ_100367通过调控miR-885-5p轴介导甲状腺乳头状癌免疫逃逸

作     者：封海岗 刘国文 曹洪 FENG Haigang;LIU Guowen;CAO Hong

作者机构：南华大学衡阳医学院附属第二医院乳甲外科湖南衡阳421001 深圳市第二人民医院甲乳外科广东深圳518025 

出 版 物：《现代肿瘤医学》 (Journal of Modern Oncology)

年 卷 期：2023年第31卷第11期

页      面：1979-1985页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：湖南省卫生健康委课题(编号:202204013935) 湖南省自然科学基金(编号:2018JJ2354) 湖南省衡阳市科技局指导性项目(编号:202121034412) 

主　　题：circ_100367 m^(6)A修饰 miR-885-5p 甲状腺乳头状癌 免疫逃逸 

摘      要：目的:探讨m^(6)A修饰的circ_100367对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)免疫逃逸的影响,并阐述其可能的机制。方法:采用qRT-PCR法检测PTC患者癌组织及其癌细胞株中circ_100367和miR-885-5p的表达水平。将circ_100367干扰质粒(si-circ_100367)及其阴性对照干扰质粒(si-NC)、circ_100367过表达质粒(oe-circ_100367)及其阴性对照质粒(oe-NC)和miR-885-5p mimics及其阴性对照NC mimics分别转染至TPC1细胞中,分为Blank组、si-circ_100367组、si-NC组、oe-circ_100367组、oe-NC组、miR-885-5p mimics组和NC mimics组。采用qRT-PCR法检测各组TPC1细胞中circ_100367和miR-885-5p的表达水平;采用双荧光素酶报告系统验证circ_100367可靶向调控miR-885-5p;MeRIP-qPCR法检测circ_100367的m^(6)A甲基化水平;Transwell法检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Western blot检测细胞FASL、IDO1、PD-L2和PD-L1表达水平。结果:circ_100367在PTC患者癌组织及其癌细胞株K1、TPC1和IHH4中表达水平明显升高(P0.05),而miR-885-5p表达水平明显降低(P0.05)。双荧光素酶报告系统结果说明:circ_100367靶向负调控miR-885-5p。MeRIP试验结果显示:circ_100367含有丰富的m^(6)A甲基化,且与NC mimics比较,miR-885-5p mimics细胞中circ_100367的m^(6)A甲基化水平明显降低(P0.05)。此外,与Blank或si-NC比较,si-circ_100367细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显降低(P0.05);与Blank或oe-NC比较,oe-circ_100367细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显升高(P0.05);与Blank或NC mimics比较,miR-885-5p mimics细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显降低(P0.05)。结论:m^(6)A甲基化修饰的circ_100367能诱导PTC细胞侵袭,影响PD-L1的表达进而促进免疫逃逸,其可能与m^(6)A甲基化修饰的circ_100367和miR-885-5p竞争性结合有关。