重组大肠杆菌合成聚(3-巯基丙酸)和聚(3-羟基丁酸-3-巯基丙酸)的研究(英文)

作     者：刘双江 Tina Lütke-Eversloh Alexander Steinbüchel 

作者机构：中国科学院微生物研究所北京100080 Institute of Microbiology 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2003年第19卷第2期

页      面：195-199页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

主　　题：重组大肠杆菌 聚3—巯基丙酸 聚3—羟基丁酸—3—巯基丙酸 生物合成 聚羟基烷酸 生物多聚物 

摘      要：利用Clostridiumacetobutylicum的丁酸激酶基因 (buk)和磷酸转丁酰基酶基因 (ptb) ,以及Thiocapsapfennigii的PHA合成酶基因 ,设计了一条能够合成多种聚羟基烷酸的代谢途径 ,用构建的质粒转化大肠杆菌 ,获得了重组大肠杆菌菌株。前期的研究表明 ,在合适的前体物条件下 ,该重组大肠杆菌能够合成包括聚羟基丁酸、聚 (羟基丁酸 戊酸 )等多种生物聚酯 [LiuandSteinb櫣ｃｈｅｌ,*** .Microbiol.6 6 :739 743]。利用该重组大肠杆菌 ,通过生物催化作用合成了 3 巯基丙酸的同型共聚酯 ,同时利用该重组大肠杆菌还获得了含 3 巯基丙酸单体的多种异型共聚物。实验首先研究了 3 巯基丙酸对大肠杆菌生长的影响 ,在此基础上优化了培养过程中添加 3 巯基丙酸的时机和浓度 ,结果表明 ,在实验的条件下 ,细胞合成聚 (3 巯基丙酸 )可达 6 7% (占细胞干重 ) ,合成聚 (3 羟基丁酸— 3 巯基丙酸 ) (分子中 3 巯基丙酸 :3 羟基丁酸 =3:1)可达 2 4 3%。实验进一步研究了同时或分别表达以上 3个基因的重组大肠杆菌合成聚合物的能力 ,结果表明只有当 3个基因同时表达时才能合成聚合物 ,说明 3个基因对合成过程是必须的 ,从而表明了合成途径是按照设计的路线进行的。还通过GC MS、GPC、IR等手段对合成的化合物进行了定性?