CYP27A1通过调节活性氧生成影响肝细胞癌生长

作     者：张昕彤 吴昊 胡艳芬 张文桃 畅靖嘉 朱剑军 李莉 刘铭 

作者机构：山西医科大学基础医学院医学细胞生物与遗传学教研室 

出 版 物：《解放军医学杂志》 (Medical Journal of Chinese People's Liberation Army)

年 卷 期：2023年

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81902513) 山西省应用基础研究计划项目(202103021224228 20210302124376) 

主　　题：肝细胞癌 细胞色素P450家族27亚家族A成员1 恶性生长 

摘      要：目的 分析细胞色素P450家族27亚家族A成员1(CYP27A1)对肝细胞癌(HCC)预后的影响及生物学作用，并初步探讨其调控HCC恶性生长的分子机制。方法 基于TCGA数据库分析CYP27A1在HCC中的表达情况及其与HCC患者预后的关系；基于CYP27A1表达量中位值，将样本分为CYP27A1高表达组(n=170)与CYP27A1低表达组(n=170)，利用GSEA分别对两组进行基因集富集分析；免疫荧光染色检测及数据库查找CYP27A1蛋白亚细胞定位；构建过表达CYP27A1质粒，转染HCC细胞MHCC-97H和HCCLM3，设置阴性对照组(转染空载质粒)与CYP27A1过表达组(转染过表达CYP27A1重组质粒)。采用CCK-8、流式细胞仪、活性氧(ROS)荧光探针等检测过表达CYP27A1对HCC细胞活力、凋亡及ROS生成的影响；结合生物信息学分析CYP27A1与ROS生成相关基因及HCC增殖相关基因表达的相关性。结果 与正常肝组织比较，HCC组织中CYP27A1mRNA表达量明显降低(P0.01)。CYP27A1表达与HCC患者性别、T分期、肿瘤分级和肿瘤分期有关(P0.05)。CYP27A1低表达组总生存率明显低于高表达组(P0.01)。GSEA富集分析结果显示，CYP27A1低表达组HCC“干性亚类和“增殖亚类基因集水平升高。在MHCC-97H和HCCLM3细胞中，CYP27A1主要定位于细胞核；在HepG2细胞中，CYP27A1主要定位于线粒体。与阴性对照组比较，过表达CYP27A1后，HCC细胞活力下降(P0.01)、ROS水平降低(P0.05)，而细胞凋亡水平无明显改变。CYP27A1与抑制ROS生成相关基因表达呈正相关(P0.05)，抑制ROS生成相关基因与HCC增殖相关基因表达呈负相关(P0.05)。结论CYP27A1在HCC中呈低表达，下调CYP27A1可能通过促进ROS生成促进HCC恶性生长。