猫细小病毒和猫疱疹病毒1型双重TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作     者：于孔森 周茜 林青青 李玮卓 李文霞 王秋霞 余琦 陈蕾 王永强 YU Kong-sen;ZHOU Xi;LIN Qing-qing;LI Wei-zhuo;LI Wen-xia;WANG Qiu-xia;YU Qi;CHEN Lei;WANG Yong-qiang

作者机构：扬州大学兽医学院江苏扬州225009 扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 河南科技学院动物科技学院河南新乡453003 泰州蕾灵百奥生物科技有限公司江苏泰州225300 北京市动物疫病预防控制中心北京101199 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2023年第53卷第4期

页      面：455-461页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学委基金项目青年科学基金项目(32102680) 江苏省科学技术厅-基础研究计划(自然科学基金)项目(BK20200931)。 

主　　题：猫细小病毒 猫疱疹病毒1型 TaqMan探针 实时荧光定量PCR 

摘      要：为建立同时检测猫细小病毒(FPV)和猫疱疹病毒1型(FHV-1)的双重荧光定量PCR方法,针对FPV的VP2基因、FHV-1的UL21基因设计特异性引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了双重荧光定量PCR方法,并绘制了标准曲线,其相关系数(R2)均为0.999,具有良好的线性关系。结果显示,FPV、FHV-1最低检测限分别为4.87和2.21 copies/μL;对猫的常见病毒及细菌均无非特异反应;批内、批间试验的变异系数均小于2%。证明该方法灵敏度高、特异性强、重复性好。用建立的方法对178份样本进行检测,结果,FPV和FHV-1的阳性检出率分别为73.65%和16.85%,二者混感阳性率为15.73%,与临床确诊结果一致。上述结果表明,本研究建立的方法可用于FPV、FHV-1感染的早期诊断、定量检测和流行病学调查等。