微小RNA-10a-5p促进紫草素抗卵巢癌细胞的作用

作     者：杲飞莹 武强 潘相羽 卢丹 GAO Feiying;WU Qiang;PAN Xiangyu;LU Dan

作者机构：扬州大学医学院/转化医学研究院江苏扬州225009 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室江苏扬州225009 扬州大学临床医学院江苏扬州225009 中南大学湘雅二医院湖南长沙410011 扬州大学附属苏北人民医院江苏扬州225001 大连医科大学辽宁大连116044 

出 版 物：《实用临床医药杂志》 (Journal of Clinical Medicine in Practice)

年 卷 期：2023年第27卷第4期

页      面：15-22页

学科分类：1002[医学-临床医学] 08[工学] 09[农学] 100214[医学-肿瘤学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(82072088) 江苏省中医药局科技项目(YB201972) 扬州大学研究生科研与实践创新资助计划(KYCX21_3291) 

主　　题：卵巢癌细胞 紫草素 微小RNA-10a-5p 细胞凋亡 细胞增殖 

摘      要：目的初步探究微小RNA-10a-5p(miR-10a-5p)在紫草素抗卵巢癌中的作用。方法基于数据库分析miR-10a-5p在肿瘤中的表达水平;瞬时转染miR-10a-5p mimic及NC,通过逆转录实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-10a-5p的表达水平;使用CCK-8实验检测紫草素对SKOV3细胞的半数抑制浓度(IC_(50));通过流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;活死细胞染色比较细胞死亡情况。结果miR-10a-5p在多种肿瘤中异常表达,与对照组相比,转染miR-10a-5p mimic后可上调SKOV3细胞中miR-10a-5p的表达水平约80倍,差异有统计学意义(P0.0001);miR-10a-5p可促进卵巢癌细胞的凋亡,提高SKOV3细胞对紫草素的敏感性,其IC_(50)由2.45μmol/L降低至1.40μmol/L,降幅达42.9%。与NC相比,转染mimic可促进SKOV3细胞的凋亡,差异有统计学意义(6.73%与17.71%,P=0.0075)。与无紫草素相比,紫草素可显著促进卵巢癌细胞的凋亡,差异有统计学意义(6.73%与82.48%,P0.0001);且miR-10a-5p可协同紫草素促进SKOV3的凋亡,差异有统计学意义(82.48%与96.80%,P0.0001)。活死细胞染色结果显示,miR-10a-5p联合紫草素使更多细胞显著发生死亡(P0.0001);miR-10a-5p联合紫草素使S期细胞占比显著增高(P0.0001),从而抑制细胞增殖。通过Targetscan7.2预测发现,GATA6可能是miRNA-10a-5p的一个作用靶点。Kaplan-Meier Plotter数据库分析提示,GATA6的高表达与卵巢癌的不良预后相关,瞬时转染mimic后,GATA6 mRNA和其蛋白表达水平明显著下调(P0.0001)。结论miR-10a-5p和紫草素均可促进SKOV3凋亡,有协同抗卵巢癌的作用,且miR-10a-5p可显著提高SKOV3细胞对紫草素的药物敏感性,其可能是通过靶向作用于GATA6而产生抑癌作用。