CuSO_4对2.2.15细胞的影响
作者机构:中南大学湘雅二医院肝病研究中心湖南省长沙市410011
出 版 物:《世界华人消化杂志》 (World Chinese Journal of Digestology)
年 卷 期:2005年第13卷第10期
页 面:1225-1227页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学]
主 题:2.2.15细胞 2.2.15细胞 时间分辨荧光免疫分析技术 荧光定量PCR检测 HBVDNA 流式细胞仪检测 Annexin HBV复制 HBSAg HBeAg MTT法检测 肿瘤细胞周期 不同浓度 细胞上清 透射电镜法 mol/L MTT实验 G2+M期 细胞毒作用 细胞代谢
摘 要:目的:探讨硫酸铜(CuSO4)对2.2.15细胞代谢及HBV复制和表达的影响及其机制. 方法:采用MTT法检测CuSO4对2.2.15细胞的毒性,流式细胞仪检测细胞周期.透射电镜法,Annexin V/PI双染后双变量流式细胞仪观察CuSO4对2.2.15细胞凋亡的影响,采用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测不同浓度的CuSO4作用后2.2.15细胞上清中HBsAg,HBeAg的P/N 值.Taq man荧光定量PCR检测不同浓度CuSO4作用后上清中HBVDNA滴度. 结果:MTT实验确定CuSO4在培养液中对2.2.15细胞的最大无毒剂量是128μmol/***4作用后可引起细胞周期的改变,肝癌细胞被阻滞在G2+M期,且呈量效相关性.但是未发现CuSO4有诱导凋亡的作用,CuSO4干预12 d的结果显示2.2.15细胞上清中HBsAg,HBeAg的滴度及HBVDNA 的复制水平与对照组无明显差别. 结论:CuSO4有明显的细胞毒作用,可引起肿瘤细胞周期的改变及细胞坏死,提示了铜的抗癌作用的分子机制,CuSO4 短期处理2.2.15细胞后暂未发现其对HBV复制和表达的影响.