草莓中甲型肝炎病毒检测方法的比较

作     者：焦梦琪 尹文娇 曹经瑗 毕胜利 Jiao Mengqi;Yin Wenjiao;Cao Jingyuan;Bi Shengli

作者机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：2023年第37卷第1期

页      面：83-88页

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100403[医学-营养与食品卫生学] 10[医学] 

基　　金：国家卫生健康委疾控专项(131031103000200004)。 

主　　题：草莓 甲型肝炎病毒 前处理方法 实时荧光定量RT-PCR 

摘      要：目的对草莓中甲型肝炎病毒(hepatitis A virus, HAV)检测的两种检测方法进行优化比较, 以选出最佳的检测方法, 用于草莓中甲肝病毒的检测。方法向已知阴性冷冻草莓标本表面接种不同浓度的HAV, 优化碱性洗脱-PEG浓缩法中的牛肉浸出粉的浓度以及选择最适核酸提取试剂盒, 优化直接裂解法中的最适裂解缓冲液体积, 对草莓标本进行处理, 采用实时荧光定量RT-PCR检测回收的病毒量, 应用SPSS26.0对数据进行统计分析, 并将优化后的两种方法用于实际标本的检测。结果优化后的碱性洗脱-PEG浓缩法的牛肉浸出粉浓度选择3%, 病毒核酸提取试剂盒选择试剂盒B。优化后的直接裂解法的裂解缓冲液体积选择6 ml。对碱性洗脱-PEG浓缩法、直接裂解法在添加HAV不同浓度水平进行比较, 两种方法的HAV病毒回收率分别为21.50±1.06%、5.82±0.01%, 结果表明差异具有统计学意义。同时对四个地区共60份草莓标本进行检测, 结果均为阴性。结论优化后的碱性洗脱-PEG浓缩法灵敏度更高, 更适用于草莓标本中HAV的检测。