MicroRNA-338-3p真核表达载体的构建及其对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

作     者：郭波 王文静 赵正豪 赵凌宇 汪鲁敏 胡丽丽 宋土生 黄辰 

作者机构：西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系陕西西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科陕西西安710061 西安交通大学医学院心血管研究中心陕西西安710061 

出 版 物：《西安交通大学学报（医学版）》 (Journal of Xi’an Jiaotong University（Medical Sciences）)

年 卷 期：2014年第35卷第4期

页      面：442-446页

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 0703[理学-化学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81171398) 陕西省科技攻关项目重大科技专项(No.2010ZDKG-50)~~ 

主　　题：miR-338-3p 胃癌 表达载体 细胞增殖 

摘      要：目的构建microR-338-3p(miR-338-3p)过表达载体并探究其对人胃癌SGC-7901细胞系体外增殖的影响。方法以pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体为基础,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切和纯化后与人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸进行连接,转化至*** Top10后,经过DNA测序、BLAST检测及验证;将构建成功的载体瞬时转染入SGC-7901细胞系中,应用Real-time PCR检测miR-338-3p的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖的改变。结果测序验证成功构建了miR-338-3p的真核表达载体;瞬时转染SGC-7901细胞后miR-338-3p表达水平有显著增加,能够抑制SGC-7901细胞的体外增殖。结论成功构建了miR-338-3p的真核表达载体,获得了瞬时表达miR-338-3p的人胃癌SGC-7901细胞系,初步证实miR-338-3p过表达可抑制肿瘤细胞的增殖。