外源基因经静脉途径跨血脑屏障在大鼠脑内的特异性表达

作     者：赵浩 赵英杰 李桂林 王任直 冯铭 魏俊吉 栗世芳 马文斌 杨义 李永宁 ZHAO Hao;ZHAO Ying-jie;LI Gui-lin;WANG Ren-zhi;KONG Yan-guo;FENG Ming;WEI Jun-ji;MA Wen-bin;YANG Yi;LI Yong-ning

作者机构：中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院神经外科北京100730 青岛大学医学院附属医院神经外科 

出 版 物：《中华医学杂志》 (National Medical Journal of China)

年 卷 期：2009年第89卷第46期

页      面：3271-3275页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30571901) 

主　　题：脂质体 神经胶质原纤维酸性蛋白质 血脑屏障 半乳糖苷酶类 转铁蛋白受体抗体 

摘      要：目的构建脑特异性启动子GFAP启动的由转铁蛋白受体抗体（OX26）靶向的免疫脂质体OX26-pGFAP-IL，研究其携带外源基因LacZ在大鼠脑内的表达情况。方法将pCMV-LacZ脂质体（pCMV-Liposome）、0X26-pCMV-LacZ免疫脂质体（OX26-pCMV-IL）、OX26-pGFAP-LacZ免疫脂质体（0X26-pGFAP-IL）和空白脂质体，分别通过股静脉注射至大鼠体内。24h后Q-PCR检测LacZ基因mRNA在脑及周围器官的表达相对量，48h后检测LacZ基因在脑及周围器官的蛋白表达情况。结果药物注射24h后0X26-pCMV-IL组和0X26-pGFAP-IL组脑中LacZ基因mRNA表达相对量分别为49.2×10^-6和44.9×10^-6，显著高于pCMV-Liposome组和空白脂质体组（P〈0.05）。0X26-pCMV-IL组在周围脏器的LacZ基因mRNA相对量显著高于0X26-pGFAP-IL组（P〈0.05）。48h后0X26-pCMV-IL组和OX26-pGFAP-IL组脑中β-半乳糖苷酶活性分别为0.67pg／mg和0.92pg／mg，显著高于pCMV-Liposome组和空白脂质体组（P〈0.05）。OX26-pCMV-IL组和OX26-pGFAP-IL组在脑中β-半乳糖苷酶活性差异无统计学意义。组织化学染色OX26-pGFAP-IL组可以实现在脑内的特异性阳性表达，减少在周围脏器的阳性表达。结论OX26-pGFAP-IL通过静脉途径注射后可以透过血脑屏障，在GFAP启动子的作用下实现外源基因脑内特异性的表达，同时减少在周围脏器的非特异表达，是实现颅内疾病的非病毒载体基因治疗的一种可行的方法。