猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒双重荧光定量PCR方法的建立和应用

作     者：赵灵燕 张璐 安慧婷 王雅婷 黄靖 张红丽 董建斐 刘霞 孙仁杰 徐辉 谢荣辉 ZHAO Ling-yan;ZHANG Lu;AN Hui-ting;WANG Ya-ting;HUANG Jing;ZHANG Hong-li;DONG Jian-fei;LIU Xia;SUN Ren-jie;XU Hui;XIE Rong-hui

作者机构：浙江省动物疫病预防控制中心浙江杭州310018 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2023年第53卷第1期

页      面：16-22页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：浙江省重点研发计划项目(2021C02050) 浙江省三农九方科技计划项目(2023SNJF059)。 

主　　题：猪圆环病毒3型 猪伪狂犬病病毒 双重荧光定量PCR 鉴别诊断 

摘      要：根据猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒保守基因序列设计引物和探针,通过优化反应体系,建立了猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒双重荧光定量PCR检测方法,评估了该方法的特异性、敏感性及重复性。结果显示,该方法能特异性扩增猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒核酸,与猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、日本脑炎病毒、猪圆环病毒1型、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪博卡病毒无交叉反应。猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒的最低检测限均为10 copies/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于3%。用建立的双重荧光定量PCR方法对87份猪组织样品进行检测,结果显示,猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒3型的阳性率分别为17.24%和24.14%。上述结果表明,本研究建立的双重荧光定量PCR方法具有特异、敏感、稳定和快速的优点,可用于猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒鉴别诊断和流行病学调查。