靶向生存素基因siRNA诱导骨肉瘤细胞株U-2OS的凋亡

作     者：王佳 吕刚 顾海伦 王岩峰 WANG Jia;L(U) Gang;GU Hai-lun;WANG Yan-fen

作者机构：中国医科大学附属第一医院骨外科沈阳110001 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2006年第13卷第1期

页      面：27-31页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：骨肉瘤 RNA干扰 siRNA 生存素基因 凋亡 

摘      要：目的:体外转录合成生存素(survivin)基因siRNA,观察其在骨肉瘤细胞株U-2OS中抑制survivin基因后细胞增殖及细胞凋亡情况。方法:将U-2OS细胞分为A组(空白对照组)、B组(非特异性转染组)、C组(特异性转染组),在荧光显微镜下观察转染前后细胞形态的改变,用RT-PCR和Western blot法分别检测转染前后survivin基因mRNA和蛋白的干涉效果,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并比较各组结果。结果:荧光显微镜下可见转染后细胞增殖变慢, 凋亡细胞增加;RT-PCR结果显示survivin siRNA明显抑制survivin基因mRNA表达。Western blot法检测C组蛋白阳性表达率比A、B两组显著降低(P0．01);特异性转染组的细胞增殖缓慢,与其它两组比较有显著性差异(P0.01)。流式细胞仪检测C组细胞凋亡率与其他两组比较有显著性差异(P0．01)。结论:体外转录合成特异性survivin siRNA能有效抑制U- 2OS细胞中survivin,in mRNA及蛋白表达,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。RNA干扰技术为骨肉瘤的基因治疗提供了一种新策略。