新型杂合肽DY-CA的构建及抑菌活性评价

作     者：邵学超 赵潇颖 王丹 马嘉辉 赵远 宋顺佳 贾慧建 孙丽媛 赵云冬 SHAO Xue-chao;ZHAO Xiao-ying;WANG Dang;MA Jia-hui;ZHAO Yuan;SONG Shun-jia;JIA Hui-jian;SUN Li-yuan;ZHAO Yun-dong

作者机构：北华大学医学技术学院吉林132013 

出 版 物：《药物分析杂志》 (Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis)

年 卷 期：2022年第42卷第12期

页      面：2082-2091页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100704[医学-药物分析学] 10[医学] 

基　　金：吉林省科技发展计划项目(20190301014NY,20190304115YY) 吉林省教育厅“十三五”科学技术项目(JJKH20190657KJ) 北华大学研究生创新项目(2021025) 北华大学大学生创新创业训练计划项目(202210201074)。 

主　　题：dyskinbow-1ST 天蚕素 杂合肽 生物信息学 抑菌活性 生物膜 

摘      要：目的:构建高活性、低毒性的新型杂合肽,对其抗肺炎克雷伯菌活性进行评价,探讨其在防治肺炎克雷伯菌引起的呼吸道感染的潜在应用价值。方法:通过生物信息学软件分析亲本肽dyskinbow-1ST的理化性质,预测杂合肽活性区域,确定与天蚕素Cecropin A的构建策略;应用生物信息学软件分预测杂合肽的理化性质及抑菌活性;通过固相法合成杂合肽DY-CA,用杂合肽对肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(MIC)试验,杂合肽对肺炎克雷伯菌的时间生长曲线,羊血红细胞溶血试验,分析DY-CA的抑菌活性及生物相容性;通过结晶紫染色定量法观察生物膜的改变,研究杂合肽对肺炎克雷伯菌生物膜的抑制与清除效率。结果:经在线软件预测分析,杂合肽DY-CA为稳定的带正电荷疏水性抗菌肽,试验测得杂合肽的MIC为64μg·mL^(-1);对肺炎克雷伯菌的抑菌作用具有时间和浓度依赖性,杂合肽在3 h后表现出明显的抑制作用,2MIC、1MIC的杂合肽A基本上没有变化,肺炎克雷伯菌的生长完全被抑制;在有效浓度下,羊血红细胞溶血率为4.23%(5%)为阴性;0.5MIC(t_(0.5MIC)=11.10,P0.05)、1MIC(t_(1MIC)=17.96,P0.05)、2MIC(t_(2MIC)=14.18,P0.05)的杂合肽DY-CA均可抑制肺炎克雷伯菌生物膜的形成;0.5MIC(t_(0.5MIC)=11.10,P0.05)的杂合肽DY-CA对肺炎克雷伯菌成熟生物膜清除效果不明显,1MIC(t_(1MIC)=17.96,P0.05,)、2MIC(t_(2MIC)=14.18,P0.05)的杂合肽DY-CA可显著破坏肺炎克雷伯菌成熟生物膜。结论:本试验设计构建并筛选了具有高活性、低毒性的新型杂合肽DY-CA,对肺炎克雷伯菌具有高效、快速的抑菌作用,有望成为防治肺炎克雷伯菌引起的呼吸道疾病的新型药物。