牛病毒性腹泻病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
Establishment of TaqMan Fluorescence Quantitative PCR Method for Detection of Bovine Viral Diarrhea Virus作者机构：内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室
出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)
年 卷 期：2023年
学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金：内蒙古农业大学高层次人才引进项目（NDYB2018-2） 内蒙古农业大学高层次人才引进项目（NDGCC2016-22） 内蒙古自治区自然科学基金项目（2020MS03047）
主 题：牛病毒性腹泻病毒 TaqMan荧光定量PCR 5’UTR
摘 要：为建立一种针对牛病毒性腹泻病毒的检测方法，本研究针对牛病毒性腹泻病毒的5’UTR设计特异性引物及TaqMan探针，进行扩增，进而构建阳性重组质粒。经过条件优化建立了牛病毒性腹泻病毒的TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果显示，建立的实时荧光定量PCR检测方法在阳性标准质粒拷贝数在1×104～1×108拷贝/μL时线性关系良好，线性相关系数R2=0.998。该方法最低检测限为10拷贝/μL；可以特异性检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)，与牛冠状病毒(BCV)、牛轮状病毒(BRV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、以及牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)不发生交叉反应，病毒滴度与拷贝数线性关系良好，线性相关系数R2=0.997；与商品检测化试剂盒的符合率为97.5%。该方法为牛病毒性腹泻病毒的早期快速诊断提供了有力的技术支持。
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