甲基转移酶样因子3通过调控GLUT4-mTORC1轴影响食管鳞状细胞癌细胞的糖酵解及增殖

作     者：周锡 钟晓武 高川力 李青容 程吉兵 马强 郭晓兰 ZHOU Xi;ZHONG Xiaowu;GAO Chuanli;LI Qingrong;CHENG Jibing;MA Qiang;GUO Xiaolan

作者机构：川北医学院检验系四川南充637000 川北医学院检验科四川南充637000 川北医学院转化医学研究中心四川南充637000 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2022年第29卷第12期

页      面：1076-1086页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：四川省应用基础研究计划项目(No.2021YJ0202)。 

主　　题：食管鳞状细胞癌 甲基转移酶样因子3 葡萄糖转运蛋白4 糖酵解 mTORC1通路 

摘      要：目的:探讨甲基转移酶样因子3(METTL3)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织和细胞中的表达水平及其对ESCC细胞糖酵解和增殖能力的影响和潜在的分子机制。方法:基于TCGA数据库分析METTL3在ESCC细胞中的表达及可能的富集通路。收集2021年1月至2021年6月间在北川医学院附属医院外科手术切除的34例ESCC组织及相应癌旁组织,采用免疫组化法验证ESCC组织中METTL3的表达。采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测干扰METTL3后ESCC细胞增殖能力的变化,利用比色法检测干扰METTL3后ESCC细胞总RNA中m6A的表达水平,采用甲基化RNA免疫沉淀定量PCR(MeRIP-qPCR)检测METTL3对葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)基因mRNA的m6A修饰水平的影响,采用WB和qPCR等技术探索METTL3参与ESCC细胞糖酵解的生物学机制。结果:METTL3在ESCC组织以及细胞中均呈高表达(均P0.001)。干扰METTL3表达后,ESCC细胞的增殖能力明显减弱、细胞内总RNA的m6A修饰水平显著降低(均P0.001)。此外,干扰METTL3可显著抑制KYSE150和TE-1细胞中GLUT4基因mRNA的m6A修饰水平(均P0.01),并通过下调GLUT4的表达抑制葡萄糖的摄取以及乳酸的释放(均P0.01),最终下调mTORC1通路活性并抑制ESCC细胞的增殖;在干扰METTL3的ESCC细胞同时联合运用mTORC1通路抑制剂显示有协同的抗癌作用。结论:METTL3介导的m6A修饰通过调控GLUT4-mTORC1信号轴影响ESCC细胞的糖酵解及增殖。