BHK-21细胞中猪乙型脑炎病毒动态增殖的研究

作     者：张福良 马圣明 邢月腾 刘芳 曹金泽 ZHANG Fuliang;MA Shengming;XING Yueteng;LIU Fang;CAO Jinze

作者机构：安阳工学院生物与食品工程学院河南安阳455000 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2023年第5期

页      面：75-79,136,137页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：安阳市科技计划项目(2021C01NY044) 安阳工学院博士科研项目(BSJ2022037) 

主　　题：猪乙型脑炎病毒 BHK-21细胞 实时荧光定量PCR TCID_(50) 增殖曲线 最佳收毒时间 

摘      要：为了研究猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)在仓鼠肾细胞(BHK-21细胞)中的增殖情况,试验首先建立了实时荧光定量PCR方法,并检测该方法的敏感性、特异性和重复性,然后利用建立的实时荧光定量PCR方法和病毒半数组织感染量(TCID_(50))方法测定并比较猪JEV在BHK-21细胞中的增殖规律。结果表明:建立的猪JEV实时荧光定量PCR检测方法的扩增效率为99.3%,敏感性、特异性和重复性良好,检测敏感性可以达到1.0×10^(1)copies/μL;TCID_(50)方法测定的细胞悬液和细胞培养上清液中的病毒含量分别为1.0×10^(5.44)TCID_(50)/0.1 mL和1.0×10^(4.86)TCID_(50)/0.1 mL,实时荧光定量方法测定的病毒粒子数量分别为1.0×10^(7.50)copies/μL和1.0×10^(5.60)copies/μL,两种方法在细胞悬液中出现峰值的时间为感染病毒后60小时,在细胞培养上清液中为72小时。说明猪JEV在BHK-21细胞中增殖的最佳收毒时间是感染病毒后60小时。