日本榧原生质体的分离与纯化

作     者：张云璇 苗积广 谢明春 田松 董明哲 姜国勇 

作者机构：青岛农业大学植物基因工程研究所青岛266109 青岛市中山公园管理处青岛266071 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2013年第29卷第11期

页      面：75-78页

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(31071676) 

主　　题：日本榧 原生质体分离 纯化 

摘      要：日本榧原生质体的分离与纯化对于建立日本榧悬浮细胞无性系,从而获得次生代谢产物榧黄素等具有重要的经济价值。以日本榧一年生以及当年生叶片为分离材料,采用酶解法成功获得了完整的原生质体。试验结果表明,日本榧叶片细胞原生质体获得的最适酶浓度为:CPW+纤维素酶(Cellulase R-10)3.0%-6.0%、离析酶(Macerozyme R-10)5.0%-6.0%。原生质体的纯化使用蔗糖浓度为30%-44%。日本榧原生质体在0.7 mol/L甘露醇+50 mmol/L MES+0.5%PVP等渗液中做连续培养可以保持完整的细胞形态。