PEP-1-CAT预处理对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用

作     者：魏双 王家宁 唐俊明 黄永章 郭凌郧 张蕾 郑飞 孔霞 WEI Shuang;WANG Jia-ning;TANG Jun-ming;HUANG Yong-zhang;GUO Ling-yun;ZHANG Lei;ZHENG Fei;KONG Xia

作者机构：武汉大学人民医院心内科430060 湖北医药学院附属人民医院临床医学研究所十堰442000 

出 版 物：《国际心血管病杂志》 (International Journal of Cardiovascular Disease)

年 卷 期：2012年第39卷第4期

页      面：227-231页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81170095) 湖北省教育厅(T200811 T201112) 十堰市重大科技攻关项目(2006030Z) 

主　　题：PEP-1肽 缺氧复氧 过氧化氢酶 H9c2细胞 细胞凋亡 

摘      要：目的:探讨细胞穿透肽PEP-1介导的人过氧化氢酶(catalase,CAT)对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:利用基因工程方法表达和纯化His-tag-PEP-l-CAT融合蛋白,将H9c2细胞随机分为正常对照组(CTL)、缺氧复氧组(H/R)、H/R加CAT组(H/R+CAT)、H/R加PEP-1-CAT组(H/R+PEP-1-CAT)。分别向H/R+PEP-1-CAT及H/R+CAT组加入2 mol/L的PEP-1-CAT及CAT500μl处理6 h,将各组细胞置于缺氧箱中缺氧21 h,再复氧6 h。采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)水平;通过流式细胞仪检测细胞的凋亡水平;通过Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:与H/R组相比,H/R+PEP-1-CAT组的细胞的LDH、MDA、细胞的凋亡率及Bax的表达量均明显下降,Bcl-2的表达量升高(P0.05)。结论:PEP-1-CAT预处理通过抗氧化和抗凋亡的作用发挥对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用。