胰蛋白酶和胶原酶灌注法分离提取小鼠原代肝细胞的比较
Comparison of isolation and extraction of primary mouse hepatocytes by trypsin and collagenase perfusion作者机构：汕头大学医学院生物分析实验室广东汕头515041
出 版 物：《汕头大学医学院学报》 (Journal of Shantou University Medical College)
年 卷 期：2022年第35卷第4期
页 面：204-209页
学科分类：10[医学]
基 金：广东省科技专项资金(210705156884432) 广东省自然科学基金(2018A030307005)
摘 要：目的:胰蛋白酶和胶原酶灌注法分离提取小鼠原代肝细胞的比较。方法:改良Seglen两步灌注法,选用胰蛋白酶和胶原酶D分别对同批生长的10~16周C57BL/6J雄性小鼠进行在体灌注分离肝实质细胞,比较分离肝细胞的存活率、纯度、形态、活性、获取数量等。结果:两种方法分离得到的小鼠原代肝细胞的存活率和纯度均达到90%以上,且在形态学上无明显差异,不同培养时间的细胞活性基本一致。胶原酶灌注法所得到的细胞数量多于胰蛋白酶灌注法。结论:胰蛋白酶和胶原酶灌注法均适用于分离提取小鼠原代肝细胞,可根据实验条件选择不同的灌注方法。
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