柑橘黄龙病RAA-LFD检测方法的建立

作     者：陈海云 滕丽琼 邱英华 郑苏华 CHEN Haiyun;TENG Liqiong;QIU Yinghua;ZHENG Suhua

作者机构：南宁众册生物科技有限公司广西南宁530007 

出 版 物：《现代农业科技》 (Modern Agricultural Science and Technology)

年 卷 期：2023年第1期

页      面：61-66页

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

基　　金：2020年南宁市优秀青年科技创新创业人才培育项目(RC20200107) 

主　　题：柑橘黄龙病 等温扩增 侧流层析试纸条 快速检测 

摘      要：本研究基于柑橘黄龙病菌50S核糖体亚基基因的保守片段设计并合成引物和探针,通过对反应条件的优化,建立了柑橘黄龙病菌RAA-LFD检测方法。该方法可快速高效地完成柑橘黄龙病菌检测,灵敏度可达到10 copies/μL;特异性试验结果显示,除柑橘黄龙病菌基因组呈阳性外,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、胸膜肺炎放线杆菌、单核细胞增生李斯特菌、支气管败血波氏杆菌、沙门氏菌均为阴性,特异性良好。利用该方法检测102份柑橘叶样本,结果显示,56份样本核酸为阳性,46份样本核酸为阴性;与荧光定量PCR法、RAA荧光法比较,RAA-LFD检测法弱阳的检出率偏低,但是RAA-LFD检测法摆脱了仪器依赖,操作更简便快速,无需电泳检测,避免了核酸扩增产物开盖污染的风险,适用于柑橘黄龙病菌的快速检测,适合在基层使用。