RNA干扰抑制结肠癌细胞血管内皮生长因子表达

作     者：李铁军 康楷 宋建宁 胡瓒斓 Tong-Chuan He 张秉强 张才全 LI Tie-jun;KANG Kai;SONG Jian-ning;HU Zan-lan;HE Tong-chuan;ZHANG Bing-qiang;ZHANG Cai-quan

作者机构：重庆医科大学附属第一医院重庆400016 重庆医科大学附属第二医院重庆400010 重庆市第九人民医院重庆400700 Molecular Oncology Laboratory The University of Chicago Medical Center IL60637 USA 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2007年第27卷第8期

页      面：14-18页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家青年科学基金资助项目(30300298) 

主　　题：RNA干扰 血管内皮生长因子(VEGF) 结肠癌细胞 Northern blotting 

摘      要：目的:应用RNA干扰技术抑制结肠癌血管内皮生长因子(VEGF)表达。方法:将VEGF基因作为RNA干扰的靶区,通过E-RNAi网上提供的服务,设计两个特异的RNA干扰序列,将其装入含U6启动子的载体上,构建成抗VEGF基因的小发夹样RNA(shRNA)表达载体,再转染人结肠癌细胞HT29,通过RT-PCR、Northern blotting、免疫荧光和Western blotting,观察VEGF表达受抑的程度。结果:成功构建了两种抗VEGF基因的shRNA表达载体,RT-PCR、Northern blotting、免疫荧光和Western blotting,均发现其能明显抑制HT29细胞VEGF基因的表达,抑制率分别达42%、88%、73%和82%。结论:针对VEGF基因的shRNA表达载体能够明显抑制结肠癌细胞VEGF基因的表达。