应用基因表达谱芯片研究内皮抑素作用后人脐静脉内皮细胞株基因表达的变化

作     者：杨获 张美霞 张军军 严密 

作者机构：四川大学华西医院眼科成都610041 

出 版 物：《中华眼底病杂志》 (Chinese Journal of Ocular Fundus Diseases)

年 卷 期：2010年第26卷第4期

页      面：353-356页

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30500547) 

主　　题：基因表达谱/利用 芯片分析技术/方法 内皮抑素类/药理学 基因表达 

摘      要：目的 观察人脐静脉内皮细胞株（ECV304细胞）在内皮抑素（ES）作用前后基因表达谱的变化，并探讨其作用的分子机制。方法ES处理培养的ECV304细胞36h，抽提ES作用前后细胞mRNA，用Cy3和Cy5不同的荧光标记脱氧尿嘧啶核苷三磷酸（dUTP）逆转录制备cDNA探针，与载有4096条基因的基因芯片进行杂交，通过对Cy3、Cy5荧光信号扫描后，分析经ES处理前后基因水平表达差异。结果ES处理后细胞增生减慢，抽提RNA电泳18S、28S条带清晰，吸光度[A，旧称光密度（OD）]值为2．0-2．2。芯片扫描显示5．96％的检测基因出现明显表达差异，其中下调基因225条，上调基因19条。结论ECV304细胞经ES作用后部分基因表达呈下调趋势，可能与ES抑制新生血管生成机制有关。