锁阳多糖通过激活PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin信号通路促进MC3T3-E1细胞成骨分化

作     者：胡俊 谈荣珍 袁忠 杨盼盼 张楚焌 张斌 沈云峰 HU Jun;TAN Rongzhen;YUAN Zhong;YANG Panpan;ZHANG Chujun;ZHANG Bin;SHEN Yunfeng

作者机构：南昌市洪都中医院骨伤七科南昌330008 南昌大学第二附属医院内分泌代谢科南昌330006 

出 版 物：《实用医学杂志》 (The Journal of Practical Medicine)

年 卷 期：2022年第38卷第22期

页      面：2774-2779页

学科分类：1005[医学-中医学] 100508[医学-中医骨伤科学] 10[医学] 

基　　金：江西省重点研发计划(编号:20192BBG70027) 

主　　题：骨质疏松 锁阳多糖 PI3K/AKT/GSK3β/β-catenin通路 成骨分化 

摘      要：目的从MC3T3-E1小鼠前成骨细胞中PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin信号通路的角度,揭示锁阳多糖(cynomorium songaricum polysaccharide,CSP)的促成骨分化机制。方法使用含有不同浓度CSP的成骨诱导液培养MC3T3-E1细胞,在第1、3、5、7天采用MTT法检测细胞活力。随后分为Con组(0μg/m LCSP)、CSP组(100μg/m L CSP)及CSP+BEZ组(100μg/m L CSP及50μmol/L BEZ(PI3K特异性抑制剂));干预14 d后采用茜素红染色观察比较MC3T3-E1的成骨分化情况、Real-time PCR定量分析相关成骨分化m RNA,如Runt相关转录因子2(Runx2)、β-连环蛋白(β-catenin)、骨钙素(Osteocalcin)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)的表达水平;并使用Western blot法检测Runx2、CollagenⅠ、Osteocalcin成骨相关蛋白;PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin通路蛋白的表达情况,以及免疫荧光检测β-catenin的核易位情况。结果与Con组(0μg/m L)相比,CSP干预均可有效促进MC3T3-E1增殖,100μg/m L的效果更加明显。与Con组比较,CSP可有效促进MC3T3-E1细胞茜素红染色的阳性率,以及成骨相关的m RNA、蛋白表达水平(P0.05),以及PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、GSK3β、p-GSK3β、β-catenin蛋白表达(P0.05),同时还可促进β-catenin入核;但是这些促进作用均可被BEZ逆转。结论CSP可能通过激活PI3K/AKT/GSK3β/β-catenin通路,诱导MC3T3-E1细胞成骨分化。