细胞羧肽酶1调控小鼠睾丸初级精母细胞GC-2增殖的作用与机制研究

作     者：张婷 王万伦 刘桐佳 刘爽 边艳超 张传领 肖瑞 ZHANG Ting;WANG Wanlun;LIU Tongjia;LIU Shuang;BIAN Yanchao;ZHANG Chuanling;XIAO Rui

作者机构：内蒙古医科大学内蒙古自治区分子病理学重点实验室内蒙古呼和浩特010059 内蒙古医科大学药学院内蒙古呼和浩特010110 

出 版 物：《中国医药导报》 (China Medical Herald)

年 卷 期：2022年第19卷第32期

页      面：10-13,30页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071008[理学-发育生物学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31760304) 教育部“春晖计划”合作科研项目(教外司留〔2019〕1383号) 内蒙古自治区科技计划项目(2019GG154) 内蒙古自治区自然科学基金项目(2020LH03016) 

主　　题：细胞羧肽酶1 小鼠睾丸初级精母细胞 细胞周期蛋白依赖性激酶2 细胞周期蛋白B1 细胞周期蛋白D1 

摘      要：目的探讨细胞羧肽酶1(CCP1)在小鼠睾丸初级精母细胞(GC-2)增殖中的作用及分子机制。方法体外正常培养GC-2细胞,利用含有空载质粒与CCP1重组质粒的慢病毒感染GC-2细胞构建阴性对照组(NC组)与CCP1过表达组(GC-2+CCP1组)细胞。CCK-8法与流式细胞术分别检测CCP1过表达对GC-2细胞增殖与周期的影响;实时荧光定量PCR检测细胞周期蛋白依赖性激酶2(Cdk2)、细胞周期蛋白B1(Ccnb1)和细胞周期蛋白D1(Ccnd1)的表达;Western blot检测Cdk2蛋白表达。结果CCK-8与流式细胞术结果显示,GC-2+CCP1组细胞的体外分裂增殖能力低于NC组,并发生了G_(2)/M期阻滞,差异有统计学意义(P0.05)。GC-2+CCP1组细胞的CDK2 mRNA与蛋白表达高于NC组、Ccnb1与Ccnd1 mRNA低于NC组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论CCP1过表达可能通过影响细胞周期因子Cdk2、Ccnb1与Ccnd1的表达抑制GC-2细胞体外增殖能力发生G_(2)/M期阻滞。