猪源IRAV的克隆、表达及单克隆抗体的制备

作     者：王桦 焦亚娟 孔宁 孙大格 董苏洁 陈晓勇 翟焕杰 童武 郑浩 于海 虞凌雪 童光志 单同领 WANG Hua;JIAO Yajuan;KONG Ning;SUN Dage;DONG Sujie;CHEN Xiaoyong;ZHAI Huanjie;TONG Wu;ZHENG Hao;YU Hai;YU Lingxue;TONG Guangzhi;SHAN Tongling

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2022年第30卷第5期

页      面：126-134页

学科分类：090602[农学-预防兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金(31872478 32102665 31760741) 

主　　题：猪源IRAV 系统发育分析 表达 定位 单克隆抗体 

摘      要：干扰素调节的抗病毒基因(IRAV)是近年来被发现的一种具有抗病毒活性的新型干扰素刺激基因,其对登革热病毒的增殖具有良好的抑制作用,但目前鲜有猪源IRAV基因的研究。本研究,从PK-15细胞中克隆了IRAV全长的cDNA。猪源IRAV cDNA全长为1241 bp,其中包含858 bp的开放阅读框,编码一个大小为285个氨基酸的多肽,定位于细胞质。将猪源IRAV蛋白在BL21(DE3)中诱导表达,经纯化后免疫雌性BALB/c小鼠,最终获得5株分泌猪源IRAV单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞,分别命名为2B10、2G12、2H1、5A8和2C5。将获得的分泌性抗IRAV单克隆抗体经Western blot和间接免疫荧光试验分析后,确定该抗体可以与PK-15细胞中过表达的猪源IRAV发生特异性反应。本研究成功制备针对猪源IRAV的单克隆抗体,为后续深入研究猪源IRAV的功能奠定了基础。