盐度对天津厚蟹Na^(+)/K^(+)-ATPase、GDH酶活性及GDH基因表达的影响

作     者：左迪 马长安 吴东蕾 张云飞 ZUO Di;MA Chang'an;WU Donglei;ZHANG Yunfei

作者机构：上海城建职业学院健康与社会关怀学院上海201415 上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所上海201403 上海科技馆上海自然博物馆自然史研究中心上海200041 

出 版 物：《水产学杂志》 (Chinese Journal of Fisheries)

年 卷 期：2022年第35卷第5期

页      面：34-42页

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金(31572221) 国家高等职业教育食品营养与检测专业教学资源库一级子项目《水产品检测技术》课程资源(A3-2018-046) 上海城建职业学院人才引进与师资队伍建设项目(B101-0101-20-001) 

主　　题：天津厚蟹 盐度 渗透压调节 Na^(+)/K^(+)-ATPase 谷氨酸脱氢酶(GDH)基因 

摘      要：将体质量(9.91±2.01)g的经暂养的天津厚蟹(Helice tientsinensis Rathbun)暴露于6个盐度梯度:低盐组(0、2、4)、高盐组(16、32)和对照组(8),每组设三个平行,分别于0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h和96 h时,冰浴麻醉30 min后取肌肉和鳃组织,测定鳃和肌肉组织中Na^(+)/K^(+)-ATPase和谷氨酸脱氢酶(GDH)活性的变化,并从肌肉中克隆获得了GDH基因全长(GenBank登录号:KJ649743),以研究湿地围垦导致的盐度变化对天津厚蟹渗透压相关酶及基因表达的影响。结果表明,低盐胁迫48 h内,天津厚蟹Na^(+)/K^(+)-ATPase和GDH活性随水体盐度的降低呈上升趋势,96 h后,0和2盐度组酶活性随盐度降低而显著下降(P0.05);高盐胁迫组,24 h内天津厚蟹组织中两酶活性升高,随盐度胁迫时间延长,16盐度组天津厚蟹鳃和肌肉组织中Na^(+)/K^(+)-ATPase活性低于对照组,GDH活性高于对照组,差异显著(P0.05);32盐度组Na^(+)/K^(+)-ATPase和GDH活性低于对照组,显著高于0、2盐度组(P0.05)。这表明低盐胁迫对两酶活性的影响更强。RACE技术获得天津厚蟹GDH基因cDNA全长为2078 bp,包含编码546个氨基酸的1641 bp的开放阅读框(ORF),预测分子量为60.54 kDa;Realtime-PCR实验结果表明:GDH基因在肌肉组织中表达量最高,且盐度胁迫后表达量变化明显,其中低盐胁迫组GDH基因表达量极显著低于对照组,表明GDH基因可能参与天津厚蟹的渗透压调节。