水稻苗期致死突变体的鉴定及其基因定位

作     者：唐跃辉 赵雨凡 林锦 王胤 曹博远 车怡帆 杨文杰 包欣欣 杨同文 TANG Yue-hui;ZHAO Yu-fan;LIN Jin;WANG Yin;CAO Bo-yuan;CHE Yi-fan;YANG Wen-jie;BAO Xin-xin;YANG Tong-wen

作者机构：周口师范学院生命科学与农学学院周口466001 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2022年第38卷第10期

页      面：124-131页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：河南省自然科学基金(202300410520) 河南省高等学校重点科研项目(21A180028) 河南省科技攻关项目(212102110467) 

主　　题：水稻 肽链释放因子1 ls突变体 苗期致死 

摘      要：肽链释放因子RF1通过识别终止密码子在翻译终止过程中起重要调控作用。获得水稻苗期致死突变体,明确OseRF1-1表达模式,为进一步研究OseRF1-1功能奠定基础。以粳稻花之舞和T-DNA插入突变体为材料,利用Tail-PCR、石蜡切片技术、Southern杂交和Northern杂交技术鉴定一个肽链释放因子eRF1-1的T-DNA单拷贝插入突变体ls。采用DNAMAN6.0软件和SMART对OseRF1-1进行生物信息学分析,利用RT-qPCR方法分析OseRF1-1的组织特异性表达。通过PEG介导方法转化拟南芥,明确OseRF1-1的亚细胞定位。结果显示,ls突变体植株在3-5叶分蘖期迅速死亡;ls突变体叶鞘与分蘖节连接区域褐化,分蘖节越往下部位症状较严重;Tail-PCR分析结果显示,ls突变体T-DNA插入时丢失了T-DNA的右边界和NOS的终止子序列导致GUS和OseRF1-1融合转录,而GUS的终止密码子仍然存在,进而引起OseRF1-1不能进行正常翻译;ls突变体转录出GUS和OseRF1-1的融合转录子;OseRF1-1在各组织中均检测到表达且在穗中高表达;该基因定位于细胞核和细胞质。ls突变体导致水稻苗期致死可能是由于T-DNA插入OseRF1-1导致该基因不能正常转录引起。