冰冻对弓形虫GT1速殖子体外感染力的影响

作     者：郭海婷 谭洁 何玉林 梁雪 李中原 GUO Hai-ting;TAN Jie;HE Yu-lin;LIANG Xue;Li Zhong-yuan

作者机构：桂林医学院基础医学院广西脑与认知神经科学重点实验室广西桂林541199 

出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期：2022年第17卷第10期

页      面：1145-1149页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：广西自然科学基金项目(No.2019GXNSFBA185031) 广西研究生教育创新计划项目(No.JGY2022198) 广西高等学校千名中青年骨干教师培育计划第4期资助项目(No.2020-58) 桂林医学院新引进博士科研启动项目(No.31304018021) 

主　　题：弓形虫 GT1 冰冻 感染 

摘      要：目的探讨冰冻不同时间对弓形虫GT1速殖子体外感染力的影响。方法用HFF细胞传代GT1速殖子3次,刮净培养物,取2.0 mL充分破碎后计数。将剩余培养物中速殖子调至10000个/mL,分装至1.5 mL离心管(100μL/管),并随机分成3组。上述样品放置于4℃,分别在0、12、24、36、48、60 h时取出样品,5管/组,再置于4℃、-20℃或-80℃保存。待首批冰冻72 h时取出全部样品,于室温(约22℃)完全融化后全量加入预先铺有HFF细胞的6孔培养板内,继续培养。于10倍物镜下随机选取3个视野,观察并记录感染3、5、7 d时的噬斑形成数,若噬斑总数为0,则进行全视野扫描检测。盲传感染7 d仍未检测到噬斑形成的培养物,用全视野扫描盲传7 d时各瓶内的噬斑。结果随机观察3个视野,复苏前4℃放置的GT1速殖子仅在感染3 d时形成的噬斑清晰可辨,且各孔间无明显不同;-20℃和-80℃冰冻均能减弱GT1速殖子的体外感染力。盲传后观察,经-20℃和-80℃冰冻24 h的GT1速殖子仍能在感染HFF细胞7 d时形成噬斑,且-80℃较-20℃冰冻组形成的噬斑数更多;冰冻36 h及以上的GT1速殖子未形成噬斑。结论以1000个速殖子/孔的剂量感染6孔培养板内的HFF细胞,4℃放置不超过72 h对GT1速殖子体外毒力无显著影响,-20℃或-80℃冰冻36 h及以上能减弱弓形虫GT1速殖子体外感染力。