Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响
Effects of Tspan8 Gene Knockout Combined with Anlotinib on Proliferation,Migration,Invasion and Apoptosis of Colon Cancer SW480 Cells作者机构:兰州大学第二临床医学院兰州730000 兰州大学第二医院消化内科兰州730000
出 版 物:《肿瘤防治研究》 (Cancer Research on Prevention and Treatment)
年 卷 期:2022年第49卷第10期
页 面:1028-1036页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
摘 要:目的探讨Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法采用CRISPR/Cas9技术构建质粒并敲除SW480细胞的Tspan8基因,Western blot法检测敲除效果。采用MTT法计算安罗替尼的半数抑制浓度(IC_(50))。实验分为对照组、安罗替尼组、Tspan8敲除组和联合组。采用细胞增殖实验、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室法和流式细胞术检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡情况;Western blot法检测安罗替尼对SW480细胞中Tspan8表达水平的影响。结果在Tspan8敲除组中,SW480-KO-Ⅲ细胞的敲除效率最高,用于后续实验。不同浓度的安罗替尼在不同作用时间均能抑制SW480细胞的增殖(P0.01),且呈浓度依赖性和时间依赖性(P0.01),根据IC_(50)选择14μmol/L为后续实验浓度。与对照组相比,安罗替尼组、Tspan8敲除组和联合组的细胞增殖、迁移及侵袭能力显著降低,细胞凋亡水平明显提高(P0.05),且联合组的上述变化较安罗替尼组或Tspan8敲除组更为显著(P0.05)。与对照组相比,安罗替尼组SW480细胞的Tspan8表达水平明显下降(P0.01)。结论Tspan8基因敲除联合安罗替尼能协同抑制SW480细胞增殖、迁移、侵袭,并促进其凋亡。