种子种苗上黄瓜绿斑驳花叶病毒IC-RT-PCR检测方法的建立及应用

作     者：任春梅 杨柳 缪倩 陆芳 季英华 程兆榜 REN Chunmei;YANG Liu;MIAO Qian;LU Fang;JI Yinghua;CHENG Zhaobang

作者机构：江苏省农业科学院植物保护研究所南京210014 

出 版 物：《植物保护》 (Plant Protection)

年 卷 期：2022年第48卷第5期

页      面：212-219页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 

基　　金：江苏省农业科技自主创新[CX(19)3108] 国家公益性行业(农业)科研专项(201303028)。 

主　　题：黄瓜绿斑驳花叶病毒 免疫捕获RT-PCR 灵敏度 特异性 

摘      要：黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)是一种检疫性植物病毒,种传和农事操作是其主要传播途径,因此种子和种苗的早期检测尤为重要。鉴于种子检测的特殊性及幼苗病毒含量低的特点,本试验通过制备CGMMV单克隆抗体,结合特异性引物,建立了黄瓜绿斑驳花叶病毒的IC-RT-PCR早期检测方法,比较了IC-RT-PCR与DAS-ELISA和RT-PCR方法的特异性、灵敏度,并对实际检测效果进行了评价。在操作程序上,IC-RT-PCR法与DAS-ELISA法一样简便,但灵敏度远大于DAS-ELISA。IC-RT-PCR与RT-PCR均可检出20~25 ng种子上的病毒,且特异性相当,而DAS-ELISA法只可检出10μg种子上的病毒。综上所述,IC-RT-PCR法可简便有效地应用于种子和种苗上CGMMV的检测,为病毒防治的早期干预提供技术支撑。