大鼠全层巩膜切除眼外滤过术后前房相关性免疫偏离的研究

作     者：徐建江 孙兴怀 XU Jian-jiang;SUN Xing-huai

作者机构：复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科上海200031 

出 版 物：《中华眼科杂志》 (Chinese Journal of Ophthalmology)

年 卷 期：2009年第45卷第1期

页      面：32-37页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：上海市科学技术委员会科研计划基金（05ZR14025） 

主　　题：虹膜切除术 滤过外科手术 血房水屏障 超敏反应 迟发型 大鼠 

摘      要：目的研究大鼠全层巩膜切除眼外滤过术后前房相关性免疫偏离（ACAID）诱导能力的变化及其与术后时间的关系。方法对照实验研究。50只近交系Wistar大鼠，右眼为实验眼，建立全层巩膜切除眼外滤过术模型后，采用计算机随机数字表法分为5组，每组10只鼠。另外5只SD大鼠，1只Wistar大鼠，提供诱导ACAID所需去上皮角膜片。A组为阴性对照组，在全层巩膜切除眼外滤过术后1周，前房植入Wistar大鼠角膜片；B组为阳性对照组，在全层巩膜切除眼外滤过术后1周，颈部皮下注射SD大鼠脾细胞，前房不植入角膜片；C、D、E组为实验组，分别在全层巩膜切除眼外滤过术后1、4、8周，前房植入SD大鼠角膜片。B组在颈部皮下注射sD大鼠脾细胞悬液，1周后右耳廓皮下注射SD大鼠脾细胞悬液，诱导迟发型超敏反应。其他各组均在前房植入角膜片，2周右耳廓皮下注射SD大鼠脾细胞悬液，诱导迟发型超敏反应。耳廓膨胀指数反映诱导迟发型超敏反应的程度。同时各组取心脏血，检测血清中白细胞介素（IL）-4和IL-10浓度，取脾脏组织检测细胞转录因子GATA-3 mRNA表达水平。通过诱导迟发型超敏反应，检测Th2的GATA-3和Th2细胞来源细胞因子IL-4及IL-10，分析机体免疫状态，并进而评价ACAID。此外，各组鼠取心脏血和脾脏组织后，再摘除眼球，进行组织病理学检查，观察前房炎性反应变化。采用SPSS 13．0统计学软件进行数据分析。多组间诱导迟发型超敏反应、IL-4、IL-10及逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测结果比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD法，各组数据与阳性对照组或阴性对照组比较采用t检验。结果（1）诱导迟发型超敏反应检测，结果显示全层巩膜切除眼外滤过术后，B、C、D、E组鼠均诱发出迟发型超敏反应。（2）血清IL-4和IL-10浓度检测，结果表明全层巩膜切除眼外滤过术后，3个实验组间血清IL-4及IL-10浓度差异均有统计学意义（F=49．124，6．336；均P〈0．01）；其中D组鼠血清IL-4及IL-10浓度明显低于C组和E组；血清IL-4及IL-10浓度呈现随术后短时间内上升，而后下降，并随时间推移再次增高的趋势。（3）脾脏组织GATA-3表达检测，结果显示D组和E组鼠脾脏组织中GATA-3表达明显上调。（4）眼球组织病理学检查，可见C组鼠前房内有少量炎性渗出和炎性细胞，D组和E组鼠前房内未见明显炎性渗出和炎性细胞。结论大鼠全层巩膜切除和眼外滤过术后，将暂时失去诱导ACAID的能力。但随术后前房炎性反应的消退，血清IL-10及IL-4浓度再次增高，脾脏GATA-3表达明显上调，表明机体ACAID的诱导能力有逐渐恢复的趋势。