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Coγ射线照射对人脐静脉内皮细胞线粒体结构和功能的影响

Effect ofCo γ-ray irradiation on mitochondrial structure and function of human umbilical vein endothelial cells

作     者:闫凯欣 赵亚伟 王溢豪 易静 段晗 陶宁 王华 胡舜英 

作者机构:军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所 解放军总医院心血管病医学部 安徽医科大学生命科学学院 

出 版 物:《中国药理学与毒理学杂志》 (Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology)

年 卷 期:2022年

学科分类:0831[工学-生物医学工程(可授工学、理学、医学学位)] 08[工学] 

基  金:国家自然科学基金(82173450) 

摘      要:目的探讨Co γ射线照射对血管内皮细胞线粒体结构和功能的影响。方法分别采用Co γ射线0(细胞对照组),5,10和20 Gy单次照射人脐静脉内皮细胞(HUVEC),照射后24和48 h,采用流式细胞术检测细胞凋亡;荧光探针H2DCF-DA标记,用激光共聚焦显微镜检测细胞产生活性氧(ROS)水平;JC-1探针标记,分别用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位;通过钙黄绿素-AM探针标记,激光共聚焦显微镜定性检测线粒体膜通道孔(mPTP)开放状态;电镜观察线粒体结构变化;Western印迹法检测线粒体分裂相关标志物磷酸化动力相关蛋白1(p-Drp1)和磷酸化线粒体分裂因子(p-Mff)蛋白表达水平。结果与细胞对照组相比,照射后24和48 h,5,10和20 Gy组细胞凋亡率增加(P0.01);5 Gy组(P0.05)、10 Gy组(P0.01,P0.05)和20 Gy组(P0.01)细胞ROS水平增加;5 Gy组(P0.01,P0.05)、10 Gy组(P0.01)和20 Gy组(P0.01)细胞mPTP开放增加。流式细胞术和荧光显微镜检测结果显示,与细胞对照组相比,照射后24和48 h,5,10和20 Gy组线粒体膜电位下降(P0.01)。电镜观察显示,与细胞对照组相比,照射组照射后48 h,单个线粒体面积增加(P0.05,P0.01),单个线粒体周长增加(P0.05),线粒体密度下降(P0.05,P0.01),异常线粒体数量大幅增加(P0.01)。与细胞对照组相比,各照射组照射后48 h,p-Drp1和p-Mff蛋白表达水平均显著增加(P0.05,P0.01)。结论Co γ射线照射加重血管内皮细胞线粒体损伤,促进线粒体分裂,诱发线粒体功能障碍。

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