龙眼AFLP银染体系的建立与优化

作     者：李冬波 朱建华 李鸿莉 黄凤珠 李江舟 潘丽梅 

作者机构：广西农业科学院园艺研究所广西南宁530007 广西大学农学院广西南宁530004 

出 版 物：《安徽农业科学》 (Journal of Anhui Agricultural Sciences)

年 卷 期：2008年第36卷第3期

页      面：893-894,907页

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：广西科学基金项目(桂科自0728070 桂科自0339023) 广西农科院科技发展基金2005001Z 

主　　题：AFLP 龙眼 银染 

摘      要：[目的]优化龙眼AFLP银染体系中的影响因素。[方法]以23份龙眼品种和2份龙眼近缘植物龙荔为试材,通过对扩增片段长度多态性(AFLP)反应体系中的几个影响因素(DNA提取、酶切与连接、电泳与银染)进行研究,建立起龙眼AFLP银染分析体系。[结果]用紫外分光光度计检测样品DNA质量和浓度,发现提取的DNA吸光度A260/A280比值在1.8左右,A260/A230的比值大于2.0,说明所提取的DNA样品纯度较高,无蛋白质或盐类的污染。酶切与连接中采用37℃水浴5 h,然后转入65℃水浴2 h的方法能保证酶切充分,又能防止酶切过度。电泳和银染时用4℃预冷的显影液进行显影,可以降低显影速度。[结论]采用该技术体系得到的AFLP指纹式样清晰,重复性强,适宜用作龙眼品种鉴别和遗传多样性分析。