利用Hsp基因调控元件构建胞内表达的***-BCG穿梭载体

作者机构：西安第四军医大学西京医院微生物学教研室 西安第四军医大学西京医院呼吸内科 

出 版 物：《中华放射医学与防护杂志》 (Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection)

年 卷 期：2003年第8期

页      面：632-632页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主　　题：穿梭载体 分枝杆菌 表达 

摘      要：目的构建能够携带外源蛋白基因并能在胞内表达的***-BCG (Bacille Calmette-Guerin)穿梭载体. 方法用多聚酶链式反应(PCR)从结核分枝杆菌毒株H37Rv基因中扩增出结核分枝杆菌热休克蛋白(Hsp)60 N端6个氨基酸及其上游调控元件基因,克隆入***-BCG穿梭载体pOLYG中,以屋尘螨抗原(Der p2)为外源蛋白,用间接免疫荧光染色法观察该载体介导的Der p2基因在牡牛分枝杆菌(***)宿主中的表达. 结果经测序证实所克隆的Hsp60ss基因序列正确,所构建的胞浆内表达***-BCG穿梭载体(pIC)能完成在大肠杆菌和***细胞之间的穿梭,并介导抗生素抗性基因的表达,经免疫荧光检查外源基因Der p2可表达于***宿主胞内,并受到培养温度的调节. 结论成功构建了在***胞内表达外源蛋白的***-BCG穿梭载体.