基于FXR信号通路研究藏药十五味赛尔斗丸对胆汁淤积型肝损伤大鼠的作用机制

作     者：肖阳 宋鑫晨 兰悦嘉 颜静 曾勇 孟宪丽 陈小睿 XIAO Yang;SONG Xinchen;LAN Yuejia;YAN Jing;ZENG Yong;MENG Xianli;CHEN Xiaorui

作者机构：成都中医药大学四川成都611137 

出 版 物：《中药新药与临床药理》 (Traditional Chinese Drug Research and Clinical Pharmacology)

年 卷 期：2022年第33卷第9期

页      面：1180-1188页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：四川省科技厅区域创新合作项目(2020YFQ0032) 青海省2020年重点研发与转化计划项目(2020-SF-C33) 

主　　题：十五味赛尔斗丸 胆汁淤积型肝损伤 法尼醇X受体(FXR) 作用机制 大鼠 

摘      要：目的 评价藏药十五味赛尔斗丸对 α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的胆汁淤积型肝损伤大鼠的影响,并探讨其作用机制。方法 将雄性 Wistar 大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、熊去氧胆酸(60 mg·kg^(-1))组、藏药十五味赛尔斗丸低、中、高(0.262 5、0.525、1.05 g·kg^(-1))剂量组,各组每天灌胃相应药物 1 次,连续 9 d。至第 7 天除空白对照组外,其余各组灌胃 60 mg·kg的 ANIT 试剂进行模型复制。观察大鼠的生活状态并计算肝脏指数;HE 染色分析大鼠肝脏组织病理变化;检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)与总胆汁酸(TBA)含量;Elisa 法检测大鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)与丙二醛(MDA)的含量;采用 qRT-PCR 法和 Western-Blot 法测定大鼠肝组织中法尼醇 X 受体(FXR)、Tgr5、CYP7A1、Mrp2、BSEP 与 NTCP mRNA 及蛋白表达情况。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠肝脏指数明显升高(P0.01),肝索结构处肝细胞核严重皱缩且坏死细胞较多,血清中 ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL 和 TBA 含量明显升高(P0.01),肝组织中 SOD、GSH 含量均降低(P0.05,P0.01),MDA 含量明显升高(P0.01),肝组织中 FXR、Tgr5、NTCP、BSEP 与 Mrp2 的 mRNA相对表达明显下调(P0.01),CYP7A1 的 mRNA 相对表达明显上调(P0.01),肝组织中 FXR、Tgr5、NTCP、BSEP 与 Mrp2 蛋白表达量均降低(P0.05,P0.01),CYP7A1 蛋白表达量明显上升(P0.01)。与模型对照组比较,十五味赛尔斗丸各剂量组大鼠肝脏指数明显降低(P0.01),肝索结构清晰,肝细胞排列紧密,未见明显坏死,血清中肝功能指标、肝脏中氧化应激指标的水平均有不同程度改善(P0.05,P0.01),十五味赛尔斗丸各剂量组均可下调肝组织中 CYP7A1 的 mRNA 表达(P0.05,P0.01),上调 BSEP mRNA 表达(P0.05,P0.01),中、高剂量组可明显上调 FXR mRNA 表达(P0.01),且高剂量组可上调 Tgr5、BSEP与 Mrp2 mRNA 表达(P0.05),高剂量组可上调肝组织中 FXR、Tgr5、NTCP、BSEP 与 Mrp2 蛋白表达量(P0.05),下调 CYP7A1 蛋白表达量(P0.05)。结论 藏药十五味赛尔斗丸对胆汁淤积型肝损伤大鼠具有明显的保护作用,其机制可能是通过激活 FXR 及其下游的转运体与代谢酶,达到维持胆汁酸稳态的目的。