靶向HER2和CLDN18.2的并联嵌合抗原受体T细胞降低对胃癌的脱靶效应

作     者：孟涛 曾祥岳 金博 Meng Tao;Zeng Xiangyue;Jin Bo

作者机构：新疆医科大学附属肿瘤医院胃肠外科一病区乌鲁木齐830011 

出 版 物：《安徽医科大学学报》 (Acta Universitatis Medicinalis Anhui)

年 卷 期：2022年第57卷第10期

页      面：1595-1601页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：新疆维吾尔自治区自然科学基金(编号:2021D01C396、2017D01C385) 

主　　题：胃癌 嵌合抗原受体 T细胞 脱靶效应 免疫治疗 

摘      要：目的探讨靶向闭合蛋白18亚型2(CLDN18.2)和人类表皮生长因子受体2(HER2)的双受体嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞是否可以降低脱靶效应,并发挥抑制胃癌细胞生长的作用。方法Western blot和流式细胞术检测肿瘤细胞中CLDN18.2和HER2的表达情况;慢病毒感染法构建过表达CLDN18.2和HER2的肿瘤细胞系;慢病毒感染法构建CAR-T细胞;流式细胞术检测CAR-T细胞的阳性率和亚型分布;乳酸脱氢酶(LDH)法检测CAR-T细胞对靶细胞的细胞毒性;裸鼠移植瘤模型检测CAR-T细胞的体内抑瘤效率;免疫组化法检测肿瘤组织中CD3^(+)T细胞的浸润情况。结果成功筛选得到高表达或不表达CLDN18.2和HER2的胃癌细胞系,并构建得到CLDN18.2和HER2单独表达或同时表达的胃癌细胞系;成功构建CAR-T细胞Cz、Hbb和CHbbz;Cz和CHbbz在体外对CLDN18.2^(+)和CLDN18.2^(+)HER2^(+)的肿瘤细胞系均具有特异性的剂量依赖的细胞毒性(P0.001);在裸鼠移植瘤模型中,只有CHbbz可以对CH-AGS的肿瘤细胞产生体内抑瘤活性及T细胞的肿瘤浸润(P0.01),同时CHbbz只对CLDN18.2^(+)HER2^(+)的肿瘤细胞产生抑瘤活性及T细胞的肿瘤浸润(P0.01)。结论靶向CLDN18.2和HER2的双受体CAR-T细胞可以降低脱靶毒性发生的概率,并抑制胃癌的生长,是一种胃癌治疗的潜在方法。