十种食源性致病菌的多重PCR快速检测方法

作     者：张明娟 刘明明 余秋地 袁磊 王娟 秦爱 李根容 ZHANG Mingjuan;LIU Mingming;YU Qiudi;YUAN Lei;WANG Juan;QIN Ai;LI Genrong

作者机构：重庆市计量质量检测研究院重庆400020 

出 版 物：《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期：2022年第48卷第17期

页      面：273-281,I0015,I0016页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0903[农学-农业资源与环境] 

基　　金：重庆市市场监督管理局科研计划项目(CQSJKJ2021039) 

主　　题：食源性致病菌 多重PCR 快速检测 特异性 灵敏度 

摘      要：为建立能够同时检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌属、克罗诺杆菌属、志贺氏菌属、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157:H7、铜绿假单胞菌、粪链球菌、产气荚膜梭菌等10种食源性致病菌的多重PCR方法,通过特异性引物的设计、引物特异性验证、引物灵敏度验证和多重PCR检测体系主要反应条件优化,建立多重PCR检测体系,并对其特异性、灵敏度以及人工感染样品应用进行评价。结果表明,建立的多重PCR检测体系可以扩增出10种食源性致病菌的特异目标条带,无非特异扩增。测序结果与目的基因序列进行比对,其序列同源性高达98%,体系灵敏度可达10ng/μL。人工污染样品应用结果表明,采用多重PCR方法简单快速,仅需简单增菌,检出限可达10 CFU/mL,整个检测时间在48 h以内。建立的多重PCR检测体系特异性强、灵敏度较高,与检验机构实际检测工作联系紧密,具有推广应用价值。