副猪嗜血杆菌脂酰辅酶A合成酶活性质谱定性分析
Mass Spectrum Analysis of Acyl-CoA Synthetase Activity of Haemophilus parasuis作者机构:华南农业大学兽医学院广东广州510642
出 版 物:《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)
年 卷 期:2022年第43卷第8期
页 面:13-18页
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
摘 要:利用已纯化的FadD1和FadD2进行体外重构生化反应,通过质谱分析技术对2个脂酰辅酶A合成酶进行活性定性分析。体外酶活反应产物经UPLC-MS/MS质谱分析显示,全扫描模式,中性丢失扫描模式或多反应监测模式均显示酶活反应产物有脂酰辅酶A的生成,而且FadD1对脂酰辅酶A的转化效率要明显高于FadD2。质谱分析数据进一步确认脂酰辅酶A合成酶的生化功能,表明其在HPS存活过程中发挥着重要的生理功能,是其致病的关键蛋白之一。成功建立了脂酰辅酶A合成酶体外质谱分析方法,可为病原细菌相关基因功能研究提供技术基础。