葡萄糖调节蛋白78靶向分子探针^(68)Ga-DOTA-VAP用于肿瘤特异性microPET/CT显像

作     者：孟唤男 赵海涛 黄钢 刘建军 Meng Huannan;Zhao Haitao;Huang Gang;Liu Jianjun

作者机构：上海中医药大学201203 上海健康医学院201318 上海交通大学医学院附属仁济医院核医学科200127 

出 版 物：《中华核医学与分子影像杂志》 (Chinese Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging)

年 卷 期：2022年第42卷第8期

页      面：482-486页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100106[医学-放射医学] 10[医学] 

主　　题：神经胶质瘤 胰腺肿瘤 膜蛋白质 同位素标记 镓放射性同位素 正电子发射断层显像术 体层摄影术 X线计算机 小鼠 裸 

摘      要：目的评价68Ga-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)-丝氨酸-天冬酰胺-苏氨酸-精氨酸-缬氨酸-丙氨酸-脯氨酸(SNTRVAP,简称VAP)分子探针在体内外靶向葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的特异性以及用于GRP78阳性肿瘤microPET/CT诊断的可行性。方法将多肽VAP与双功能螯合剂DOTA偶联后进行68Ga标记,制备68Ga-DOTA-VAP分子探针。用蛋白免疫印迹法验证人脑胶质瘤细胞株U87MG、人胰腺癌细胞株BxPC-3、人胚胎肾细胞株293T细胞中GRP78表达情况,并用阻断实验验证68Ga-DOTA-VAP与上述细胞的特异性结合。建立U87MG与BxPC-3荷瘤裸鼠模型,检测68Ga-DOTA-VAP在体内的生物学分布;用microPET/CT评价68Ga-DOTA-VAP在U87MG与BxPC-3荷瘤裸鼠模型的显像效果。采用两独立样本t检验、单因素方差分析和Dunnettt检验分析数据。结果68Ga-DOTA-VAP制备简便,标记率、放化纯均大于98%,体外稳定性好,2 h后放化纯仍为(98.27±0.22)%。GRP78在U87MG、BxPC-3和293T细胞中均有表达(分别为0.78±0.02、0.53±0.05和0.36±0.03),且在肿瘤细胞中的表达高于正常细胞(F=102.22,P0.001;t值:0.43、0.18,均P0.01)。U87MG细胞对68Ga-DOTA-VAP的摄取高于BxPC-3细胞(5154.00±216.70和4344.00±60.88;t=3.10,P=0.027),过量VAP多肽可显著降低U87MG、BxPC-3细胞对探针的摄取(3324.00±54.14、3270.00±131.10;t值:8.19、7.43,均P0.01)。68Ga-DOTA-VAP经尾静脉注射后,在U87MG肿瘤组织的摄取高于BxPC-3肿瘤组织[(1.98±0.20)和(1.30±0.08)每克组织百分注射剂量率(%ID/g);t=5.48,P=0.005];注射过量VAP多肽后,肿瘤组织摄取显著降低[(0.99±0.02)和(0.62±0.05)%ID/g;t值:8.32、12.25,均P0.05]。MicroPET/CT显像示U87MG、BxPC-3模型鼠肿瘤清晰可见,U87MG模型鼠显影效果更佳;注射过量VAP多肽后,2种模型鼠肿瘤显像均不明显。结论68Ga-DOTA-VAP分子探针可与GRP78特异性结合,其可反映体内GRP78表达水平并有希望用于GRP78阳性肿瘤的特异性显像诊断。